1.4 蚕蛹蛋白的水解方法[7]
目前蚕蛹蛋白复合氨基酸的提取方法主要有酶解法和化学法。酶解法可分为单酶法和双酶法,化学法可分为碱水解法、酸水解法。在水解过程中,逐渐降解成相对分子质量越来越小的肽段,直至最后成为氨基酸的混合物。
﹙1﹚酸水解 常用硫酸或者盐酸进行水解。一般用6mol/L 盐酸,4mol/L硫酸;回流煮沸20h左右可使蛋白质完全水解。酸水解的优点是不引起消旋作用,得到的是L-氨基酸。缺点是色氨酸完全被沸酸所破坏,羟基氨基酸(丝氨酸及苏氨酸)有一小部分被分解,同时天冬酰胺和谷氨酰胺的酰胺基被水解下来。故碱法现在已很少应用。水解法虽然水解比较彻底,但是酸水解时会污染环境,腐蚀设备,耗酸量大,产品颜色较深,且需要增加赶酸设备,树脂用量大,脱酸费用高。
﹙2﹚碱水解 水解过程中多数氨基酸遭到不同程度的破坏,并且产生消旋现象,所得的产物是D-和L-氨基酸的混合物,称消旋物。此外,碱水解引起精氨酸脱氨,生成鸟氨酸和尿素。然而在碱性条件下色氨酸是稳定的。碱法不但破坏了大部分含羟基和巯基的氨基酸,而且易引起氨基酸消旋而降低其营养价值。
﹙3﹚酶水解 酶解法可分为单酶法和双酶法, 具有酶用量少,水解条件较温和,氨基酸不易被破坏等特点,但酶成本较高,水解工艺较复杂,水解时间长,水解率不够高。单酶水解时,水解条件要求较高,但蛋白质水解率不高。在单酶水解的基础上引申出了双酶水解法。双酶水解法就是向单酶水解所得溶液中再加另外一种酶重复水解。所以本实验采用酶水解。
1.5 本课题的研究目的和意义
我国是养蚕大国,蚕茧产量居世界首位。我国有22个省(市、区)有蚕桑业,蚕丝产量约占世界的4/5,有资料表明:每制得1吨生丝的同时,可以得到1吨左右的干蛹[8],我国每年获得干蛹的量可高达20多万吨,但其中绝大部分干蚕蛹被用作饲料蛋白,不仅使得资源利用率低,而且利用蚕蛹饲养的牲畜、禽鱼类等的肉质呈黄色,且带有蛹臭,严重影响了产品的质量。对于如此丰富的蚕蛹资源,如何更好地加以利用,充分发挥其潜在的能力,研究者对此问题经过反复思考和斟酌,认为将其通过化学的方法制备成技术含量更高、经济效益更为显著、用途更为广泛的复合氨基酸是一条有效的、可行的、合理的途径。我国的人均摄入蛋白质的质和量的不足仍是我国现存的主要营养学问题,蚕蛹是天然优质的含氮资源,价格低廉,经过深加工可获取高纯度的蛋白质制品,对于解决我国氮资源不足,提高我国人群膳食中的蛋白质的质和量,改善营养状况具也有十分重要的意义。
目前,我国有关蚕、蚕蛹食品化已经有约100多个专利保护技术[9],但真正在生产实践中发效益的技术并不多,蚕蛹相关产品大部分仍然是初级食品,这和目前对蚕蛹蛋白的研究密相关,目前我国蚕蛹蛋白研究中大部分是对其营养功能进行讨论和分析,或者是基于蛋白物理性质的改性、水解氨基酸的制备和氨基酸产品的研究。在蚕蛹肽的研究方面仅有极少究分析了蚕蛹肽在抑菌、降脂等方面的功能。所以如何综合利用蚕蛹蛋白成为推动我国桑蚕产业的重要方面。蚕蛹资源具有重要的意义与广阔的前景,随着人们逐渐认识到蚕蛹的营养价值和应用潜力,如何开发利用这一廉价又广泛的资源,具有重要的意义与广阔的前景。
本研究的目的:一是对现行蚕蛹制备活性多肽和氨基酸工艺进行改进和提高,提升现代化技术水平,获得一套技术完善的和先进的、经济效益显著的、具有工业化生产水平的生产工艺技术,为同类企业提供一套更为理想的生产技术;二是鼓励山区农民养殖蚕桑的积极性,巩固农民通过养蚕脱贫致富的成果。 蚕蛹活性多肽及氨基酸的制备工艺研究(4):http://www.youerw.com/shengwu/lunwen_4005.html