2 材料和方法

2.1试料

供试材料喜树花序于2014年7—8月采自杭州师范大学仁和社区15幢前一株生长状况优良的喜树（7月份每隔1天采集喜树花一次，8月份则为每隔5天采集一次）。用FAA固定液（70%酒精 90ml + 冰醋酸 5ml + 福尔马林（37%~40%甲醛5ml）固定，保存在密封的小指瓶内，置于阴凉处。

2.2方法

本次实验是采用连续石蜡切片的研究方法展开对喜树花双受精后子房壁的结构变化和细胞化学定性变化的研究论文网。主要包括了以下几个环节：

取材        固定       脱水       透明       浸蜡       包埋       切片      贴片        脱蜡        染色       封片       镜检与拍照。 

对于子房壁的结构观察采用的染色方法是番红-固绿染色法（番红染液：番红1g溶于100ml的50%酒精中；固绿染液：固绿0.1g溶于100ml的95%酒精中）[6]。细胞化学的定性检测则是：以PAS染色法检测不同时期子房壁的细胞中糖类的含量；通过苏丹Ⅵ染色法显示不同时期子房壁的细胞中脂类的动态变化[7]；用考马斯亮蓝R250染色法观察不同时期子房壁的细胞中蛋白质的分布。染色后经过脱水、透明、中性树胶固封后，再用显微镜观察，并且做好拍照记录。

3 结果

喜树的子房有子房壁和胚珠构成，子房壁分为三层，分别可以发育成喜树果实的外果皮\优尔|文'论"文:网www.youerw.com、中果皮和内果皮。喜树双受精后，子房壁逐渐发育，细胞层数不断减少，尤其是中间层的薄壁细胞。同时子房壁中的蛋白质、糖类和脂类的含量也发生了明显的变化。

3.1  喜树子房壁的结构与变化

从喜树花的子房壁的纵切由外向内，可以观察到子房壁分为三层（子房外壁、子房壁中间层、子房内壁），双受精后分别可以发育为喜树果实的外果皮、中果皮、内果皮（图版Ⅰ，1）。子房的外壁由一层角质层厚的扁平细胞组成（图版Ⅰ，2），子房的内壁则为数列长梭形的厚壁纤维细胞不规则地排列而成（图版Ⅰ，4）。子房壁的中间层则是数十列的薄壁细胞组成，散列着十数个维管束；在紧挨子房外壁的1—2层的细胞中含有簇晶，再往中间的数列细胞是较大的薄壁细胞，很多细胞中均含有丰富的内含物和发达的分泌结构（图版Ⅰ，2，3），内含物与分泌物是由形状、大小不同的，或为圆形、或为多角形的颗粒物质组成的（图版Ⅰ，5）。

双受精后子房壁发育成果皮的过程中，细胞层数逐渐减少，尤其是中间层的薄壁细胞，但是仍含有较多内含物和分泌结构（图版Ⅰ，6）。

3.2  喜树子房壁的细胞化学变化

3.2.1喜树子房壁细胞内蛋白质含量的变化

以考马斯亮蓝R250染色法观察不同时期子房壁的细胞中蛋白质的分布。通过染色观察，在喜树双受精后，子房壁中绝大多数的细胞都产生蓝色特异性反应，说明细胞内的蛋白质含量较高（图版Ⅱ，1，2）；但随着子房的不断发育，细胞蛋白质也不断减少（图版Ⅱ，3,4）；等到子房发育成为果实，果皮细胞中几乎不含蛋白质（图版Ⅱ，5,6）。

3.2.2喜树子房壁细胞内糖类含量的变化