1) 使用德国 Qiagen公司的植物RNA提取试剂盒提取植物总RNA。

2) 具体实验步骤如下：

3) 本氏烟叶片样品选取Buffer RLT裂解液。1 ml Buffer RLT裂解液中加入10 µl β-巯基乙醇（β-ME）。

4) 称取不超过100 mg的样品加入液氮中，用研钵和钵杵研磨。 加入450 µl Buffer RLT剧烈涡旋震荡。

5) 将裂解液转到Qiashredder spin柱（淡紫色），4℃14000 rpm离心2 min。

6) 将清澈的上清液中加入0.5倍体积96-100%的乙醇，立即用枪吸打混合均匀，将上步液相（约650 µl,可能有沉淀物形成）转移到RNeasy Mini spin柱（粉色），轻轻合上盖子。4℃≥10000 rpm离心30 s，丢弃滤液。向RNeasy Mini spin柱中加入700 µl Buffer RW1，轻轻合上盖子，4℃≥10000 rpm离心30 s，丢弃滤液。

7) 向RNeasy Mini spin柱中加入500 µl Buffer RPE，轻轻合上盖子，4℃≥10000 rpm离心30 s，丢弃滤液。

8) 向RNeasy Mini spin柱中加入500µl Buffer RPE，轻轻合上盖子，4℃≥10000 rpm离心2 min，丢弃滤液。

9) 将RNeasy Mini spin柱置于一个新的离心管中，悬空加入40 µl RNase-free水至RNeasy Mini spin柱膜上，合上盖子。4℃≥10000 rpm离心1 min，洗脱RNA。

10) 取1.5 µl用Nanodrop 2000测定浓度；取1 µl跑1.2% Agarose胶（150 V  20 min）。做好标记，-80℃贮存。