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麦田土壤微生物菌株分离鉴定及微生物学特性(3)

时间:2021-08-09 22:18来源:毕业论文
(4)在槽内加入1TAE电泳缓冲液,至液面覆盖过胶面。 (5)取2uL待检测的PCR扩增产物样品与2uL loading buffer混匀后,用移液抢加至凝胶的加样孔中。在第一

(4)在槽内加入1×TAE电泳缓冲液,至液面覆盖过胶面。

(5)取2uL待检测的PCR扩增产物样品与2uL loading buffer混匀后,用移液抢加至凝胶的加样孔中。在第一个加样孔中加入DNA Marker。

(6)连接电泳仪和电泳槽,并接通电源,设置电压为120v,电泳时间为30min左右。

(7)电泳结束后,小心取出凝胶块,放于凝胶成像仪中观察并拍照。

2.6.3 菌株16S r-DNA序列测定与分析

     经琼脂糖凝胶电泳检测后的PCR扩增产物送到上海生工生物工程有限公司进行测序分析,将测序结果提交到美国生物技术信息中心数据库NCBI(http://blast.ncbi.nlm. nih.gov/)中进行核酸的Blast比对。

3  结果与分析

3.1 菌株分离与菌落形态观察

从麦田土壤中分离划线培养得到的菌株。如图3-1所示,该菌在LB培养基上生长3d后,菌落呈深黄色,圆形,直径约为1mm,表面凸起,光滑,透明,边缘整齐。

麦田土壤微生物菌株分离鉴定及微生物学特性(3):http://www.youerw.com/shengwu/lunwen_79936.html
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