乙酰胺：在100 mL的0.1 M磷酸缓冲液（pH6.0）中加入1.475 g乙酰胺，过滤除菌；

Ni Sepharose 6 Fast Flow 结合缓冲剂（Binding buffer）：

10.0 mM 咪唑，溶于100.0 mM pH 7.0磷酸缓冲液中；

Ni Sepharose 6 Fast Flow 洗涤缓冲液（Washing buffer）：

20.0 mM 咪唑，溶于100.0mM pH 7.0磷酸缓冲液中；

Ni Sepharose 6 Fast Flow 洗脱缓冲液（Washing buffer）：

250.0 mM 咪唑，溶于100.0 mM pH 7.0磷酸缓冲液中；

SDS-PAGE电泳试剂：

30.0 % 分离胶贮液：29.2 % 丙烯酰胺，0.8 % N’N’-亚甲基双丙烯酰胺，过滤后棕色瓶4 ºC保藏（储存不超过2周）。

分离胶缓冲液：1.5 M Tris-HCl pH 8.8，过滤后4 ºC保存。

浓缩胶缓冲液：1.0 M Tris-HCl pH6.8，过滤后4 ºC保存

电极缓冲液： Tris-Base 3.0 g，甘氨酸14.4 g，SDS 1.0 g，双蒸水定容至1000.0 mL，室温保存。

样品缓冲液：SDS 0.5 g，50%甘油5 mL，巯基乙醇0.25 mL， 1%溴酚蓝2.0 mL，浓缩胶缓冲液2.5 mL，定容至50 .0 mL。

考马斯亮蓝R-250染色液：0.1 g考马斯亮蓝R-250，置于1.0 L烧杯中，加入250.0 mL异丙醇，搅拌溶解，加入100.0 mL冰醋酸，搅拌均匀，加入650.0 mL去离子水，搅拌均匀，用滤纸过滤除去颗粒物质，室温保存。来`自^优尔论*文-网www.youerw.com

考马斯亮蓝染色脱色液：100.0 mL冰醋酸、50.0 mL乙醇、850.0 mL蒸馏水混合均匀后使用。

缓冲液：0.1 M 醋酸钠缓冲（pH 4.0-5.5），0.1 M 磷酸缓冲液（pH 6.0-8.0），0.1 M甘氨酸-氢氧化钠缓冲液（pH 8.5-9.0）。

2.3  外切葡聚糖酶组分的分离纯化

2.3.1  外切葡聚糖酶发酵液浓缩

重组马克斯克鲁维酵母产外切葡聚糖酶发酵液4 ℃，8000 rpm离心，弃菌体，上清液通过透析法浓缩。

2.3.2  透析法浓缩11

将离心上清发酵液将在透析袋中，放在干净的保鲜袋上，并在透析袋四周撒上变色硅胶，最后浓缩至3.0 mL左右。整个过程在4 ℃或0 ℃下进行