跨种扩增法筛选花䱻多态性微卫星标记

摘要：花䱻作为名优养殖鱼类，越来越受到广大养殖户和消费者的喜爱。目前，有关花䱻的研究主要集中在生物学特性、人工繁殖及染色体分析等方面，而分子遗传方面的研究较少。本研究采用“跨种扩增”法，将鲤科不同亚科的12种鱼类中已发表的120对微卫星引物在花䱻中进行多态性筛选，以期获得花䱻多态性微卫星标记。结果显示，120对微卫星引物中，有46对可在花䱻中扩增出稳定的目的片段，其中20对引物表现为多态性，约占总引物数的16。7%，这将为今后花䱻的遗传学和基因组学研究奠定基础。75998

毕业论文关键词：花䱻，微卫星标记，跨种扩增

Abstract: As an excellent aquaculture fish, Hemibarbus maculatus Bleeker was widely loved by farmers and consumers。 Currently, studies on H。 maculatus mainly focused on biological characteristic, artificial propagation and chromosome analysis。 However, studies on genetic and molecular were quite limited。 In this study, we tried to screen polymorphic microsatellite markers for H。 maculatus by crossing species amplification from 120 microsatellite primers which had been published in 12 different subfamilies of Cyprinidae。 As a result, 46 primers could amplify stable fragment in H。 maculatus。 In the 46 primers, 20 primers showed polymorphism, accounting for about 16。7% of the total number of primers。 The study would lay the foundation for future studies on genetic and genomic of H。 maculates。

Keywords: Hemibarbus maculatus Bleeker, Microsatellite markers, Cross-species amplification

前言 4

1 微卫星的概念 4

1。1 微卫星的特点 4

1。2 微卫星的筛选方法 5

2。研究材料 7

2。1 仪器 7

2。2 材料和试剂 7

3 研究方法 7

3。1 微卫星标记的选取 7

3。2 花䱻DNA提取（苯酚-氯仿抽提法） 7

3。3 多态性微卫星标记的筛选 9

4。结果分析 10

结论 25

参考文献 26

致谢 28

前言

花䱻（Hemibarbus maculatus Bleeker）属于鲤形目、鲤科、鮈亚科、䱻属。花䱻体长，吻圆钝，口下位呈马蹄形，口角有须一对，眼突出。其背鳍起点显著隆起，腹部圆且白，体侧和背部青褐色，体侧中轴有数量不等的黑斑块。

花䱻主要分布于长江流域的江河、湖泊、水库中，一般生活在水体的中下层。花䱻性温顺，喜底栖钻洞，常聚居或出没于沿岸长有青苔的石缝、木桩等障碍物附近，对水流较敏感，尤其是春训繁殖期间，稍有水流即兴奋游窜，甚至跃出水面。它以底栖息无脊椎动物、虾、昆虫幼虫等为主食，是偏肉食性鱼类，幼鱼期以浮游动物为食，兼食一些藻类及水生植物；在人工饲养条件下可食用蛋白含量高的人工配合饲料或小颗粒饵料。论文网

花䱻性成熟4年，产卵期为6-7月份，怀卵量4。8-13万粒。卵为粘性，依此粘于植物基体上，当水温20℃时，经4天孵出苗。

花䱻肉质鲜美，营养丰富，蛋白质含量高，近年来畅销于华东地区且供不应求，其深加工产品很受东南亚消费者的欢迎，具有广阔的市场前景［1］。跨种扩增法筛选花䱻多态性微卫星标记:http://www.youerw.com/shengwu/lunwen_87081.html