从大量的研究报道中,可以看出,叶酸偶联壳聚糖纳米粒是抗肿瘤药物的理想的载体。除了其本身包封率、载药率、药物缓释效果良好,其本身所具有的对肿瘤细胞的细胞毒性,可提高抗肿瘤药物的治疗效果。以叶酸作为靶向配体,使药物靶向送往肿瘤细胞内,大大降低了其对正常细胞的毒害,同时也提高了药物的利用率。
由于叶酸偶联壳聚糖在抗肿瘤治疗上有着广泛的前景,使得叶酸偶联壳聚糖的制备也成为一个热点。在大部分的研究中,其制备均是先制备叶酸活性酯,再制备叶酸偶联壳聚糖。本课题中,也采用此方法制备叶酸偶联壳聚糖纳米粒。
1.4 选题目的与意义
大部分抗肿瘤药物的靶向性差,药物毒副作用大。以壳聚糖作为药物载体,可以提高药物性能,增强疗效,但不能解决靶向性差的问题。为解决这个问题,选用叶酸作为药物的靶向配体,利用其受体在肿瘤细胞上的过度表达,以及其与受体的高度亲和力,来完成靶向的目的。研究叶酸偶联壳聚糖的制备、表征、其药物载体特性、靶向性、细胞毒性等,是将叶酸偶联壳聚糖作为抗肿瘤药物的载体的研究基础。
本课题以叶酸为配体,壳聚糖为主体,用化学方法制备叶酸偶联壳聚糖,并用红外分析偶联是否成功,再测定其偶联率,再用MTT法测定其对MCF-7肿瘤细胞的细胞毒性。用离子交联法制备叶酸偶联壳聚糖纳米粒,并测量纳米粒的粒径和Zeta电位。
2 实验部分
2.1 叶酸偶联壳聚糖的制备
2.1.1 材料、试剂与仪器
1)主要试剂
壳聚糖:梯希爱(上海)化成工业发展有限公司
叶酸:生工生物
1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺(EDC):sigma公司
无水二甲亚飒(DMSO):solarbio
透析袋(分子截留量12000):Sigma公司
其余试剂为国产分析纯。
2)主要仪器
集热式恒温加热磁力搅拌器(DF-101S型):巩义市英峪予华仪器厂
紫外可见分光光度仪ultrospec 4300pro UV/visible spectrophotometer :GE Amersham Biosciences
78一1磁力加热搅拌器:上海江星仪器有限公司
EYELA冷冻干燥机(型号FDU-1200):上海爱朗仪器有限公司 叶酸偶联壳聚糖纳米粒的制备及细胞毒性的研究(5):http://www.youerw.com/shengwu/lunwen_8757.html