2 材料与方法

2。1 材料与试剂

材料：抗草铵膦油菜“Z7B10”（中国农科院油料所培育）、普通油菜“中双7号”。2014年9月在淮阴师范学院“生物科技园”油菜隔离区种植以上油菜品种，油菜隔离区四周建有围墙且墙外无农田，充分满足环境隔离条件。2015年3月-4月油菜盛花期，采集 “Z7B10”、“中双7号”盛开鲜花。

试剂：芦丁标准品，Sigma公司；2,4,6-三(2-吡啶基)-1,3,5-三嗪，美国公司Alfa Aesar公司；醋酸钠、醋酸、三氯化铁、无水乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠均为分析纯，国药集团化学试剂有限公司。

2。2 仪器与设备

IS9001电子天平，Sartotius公司；Infinite M200 PRO酶标仪，瑞士Tecan公司； FW100高速万能粉碎机，天津市秦思特仪器有限公司；RE2000旋转蒸发仪，上海亚荣生化仪器厂；SHB-Ⅲ循环水式多用真空泵，郑州长城科工贸有限公司；DHG-9140A电热恒温水浴锅，上海精宏实验设备有限公司；DK-S28电热恒温鼓风干燥器，上海精宏实验设备有限公司；Direct-Q3 超纯水系统，美国millipore公司。

2。3 实验方法

2。3。1 油菜花黄酮的提取

将采集的新鲜油菜花置于60℃鼓风干燥箱中干燥至恒重，经粉碎机粉碎至60目，密封干燥保存，备用。准确称取普通油菜“中双7号”油菜花粉末0。50g，加入一定浓度的乙醇溶液加热回流提取，提取液经抽滤后，加入乙醇定容于25mL容量瓶中，混匀后测定黄酮含量。来~自,优^尔-论;文*网www.youerw.com +QQ752018766-

2。3。2 标准曲线的制备

采用硝酸铝络合分光光度法测定总黄酮含量。

精密称取105℃干燥至质量恒定的芦丁标准品50mg，用70%乙醇定容至100mL，混匀，制得芦丁标准品溶液，备用。精密移取芦丁标准品溶液0、0。08、0。16、0。24、0。32、0。40、0。48mL分别置于Ep管内用70%乙醇补足体积至0。48mL，混匀，加入5%NaNO2 0。08mL，混匀后静置6min，加入10%Al(N03)3 0。08mL，混匀后静置6min，加入4%NaOH 0。8mL，再加入0。56mL 70%乙醇使体积为2mL，混匀后静置15min，分别精密移取0。2mL不同浓度的芦丁标准品溶液置于96孔板，于510nm下测定吸光值。以芦丁浓度为横坐标，吸光值为纵坐标绘制标准曲线（图1）。结果得吸光度与芦丁浓度的标准曲线Y=4。6346X+0。0383（X：芦丁浓度，mg/mL；Y：吸光值），R2=0。9998。