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引言
丙烯醛(acrolein, ACR),分子式为CH2=CHCHO,无色、有毒、具有强烈刺激性气味的液体,与水部分互溶。其蒸气有强烈催泪性。主要由丙烯氧化而成。ACR是一种强刺激性挥发气体,人体可通过消化道,呼吸道,皮肤黏膜等多种方式接触。食品在生产加工过程中,不可避免地会受到一些不安全因素影响,不安全因素不仅会影响食品色、香、味、质地的改变,还会降低食品的营养价值,甚至对人类健康安全产生危害,尤其是部分油炸食品,在高温加热过程中,油脂会发生氧化反应,导致了食品的外观和营养价值都遭到损害,同时产生具有细胞毒性脂肪氧化产物ACR。ACR具有反应活性,能与食品中的蛋白质等营养成分发生加成反应,引起蛋白结构变化和蛋白间交联。ACR通过食物摄入进入人体后,还能与人体内蛋白质和DNA反应,扰乱各种正常生理过程,对人体健康造成威胁。ACR是最简单的不饱和醛,可来源于食物,环境和人体本身。碳水化合物,植物油,氨基酸以及动物脂肪等都可以通过相关的化学反应生成。因此在日常生活中,烟气,汽车尾气,油烟,灸烤食品等均有大量的ACR。摄入的ACR量不同,对人体的危害也不同,小剂量的ACR能够抑制细胞的增值从而促进细胞凋亡,而大剂量会诱发肿瘤。具体说,ACR对于呼吸系统,心血管系统,神经系统和生殖系统都存在不同程度的危害。来自优Q尔W论E文R网wWw.YouERw.com 加QQ75201.8766
饮食中的抗氧化成分则可能对PUFAs的氧化进行阻断,以减少RCS的形成,从而抑制其毒性作用[6-8]。但目前的研究大多集中在抗氧化活性(清除氧自由基)的测定中,而对于脂肪氧化产物RCS及其毒性的研究尚不够深入。OXY是多酚类化合物,主要来源于菝葜 、葡萄(红葡萄酒)、虎杖、桑椹等植物。OXY是一种生物性很强的天然多酚类物质,是肿瘤的化学预防剂,也是对降低血小板聚集,预防和治疗动脉粥样硬化、心脑血管疾病的化学预防剂。中国植物资源丰富,且对于植物提取物的开发有巨大的潜力。因此,本文尝试利用氧化白藜芦醇(Oxyresveratrol)这种受到广泛关注的天然植物多酚类物质,研究其是否对RCS引起的蛋白毒性和细胞毒性有抑制作用。利用OXY对代表性的ACR在真实食品体系(大豆分离蛋白)中的毒性作用的抑制效果进行了评估和OXY对ACR直接清除能力进行了检测。
本实验我们采用SDS-PAGE电泳法与western blot法检测蛋白毒性利用大豆蛋白,研究OXY对大豆蛋白有没有保护作用,利用大豆蛋白+ACR,大豆蛋白+ACR+OXY等两中形式来观察添加天然植物多酚OXY后,ACR的毒性被降低的趋势。高效液相色谱(HPLC)法检测氧化白藜芦醇对ACR的直接清除效果等方法进行研究OXY抑制ACR毒性。
2。材料和方法
2。1材料与设备
材料:氧化白藜芦醇(99%),大豆蛋白 鲱鱼油、七水硫酸亚铁、维生素C、维生素E、丙烯醛、ABTS、过硫酸钾、Trolox、DPPH、DMSO、考马斯亮蓝R250、磷酸缓冲液 (PBS, 0。01M, pH 7。4)、2,4-硝基苯肼(DNPH)、色谱级乙腈等实验试剂购自美国Sigma-Aldrich公司、国药集团化学试剂有限公司或上海生工生物有限公司。大豆分离蛋白购于山东临沂山松生物制品有限公司;SH-SY5Y的细胞购于美国ATCC公司(Manassas,VA);蛋白羰基化检测试剂盒、anti-Acrolein抗体及相应二抗均购于美国Abcam公司。
设备:OHAUS AR224CN分析天平、BIO-RAD小型垂直电泳电泳槽、Power Pac Basic电源、Trans-Blot半干转印仪、Eppendorf Centrifuge 5430离心机、UNICO紫外分光光度计UV-2802S,Waters Alliance HPLC系统,Thermo Scientific VARIOSKAN FLASH全波长酶标仪等。 氧化白藜芦醇与食品中丙烯醛的相互作用研究(2):http://www.youerw.com/shiping/lunwen_175621.html