（3）酶溶法

 酶溶法是利用某些酶溶解细胞壁中特定成分，使细胞壁受破坏，进而使胞内物质释放出来的方法 

（4）物理破碎法

 主要包括冻融法和低温玻璃化。

1.4超声波的简介

超声波是一种机械振动，它在介质中传播的过程，其频率通常在20kHz以上。超声波的作用有：机械效应、热效应和空化效应，其中空化效应是主要因素。超声波是在液体媒介中传播的，从而使液体介质不断受到拉伸力和压缩力，相反液体对压力的抗性比较强，对拉力的抵抗性比较弱，当液体受到过大的拉力时，就会断裂从而形成短暂的近似真空的空洞（特别是在含有杂质、气泡的地方），当液体再次受到压力时，这些近似真空的空洞瞬间被挤压破裂，瞬间可形成高达几万个大的气压，同时还会伴随放着放电的现象，这就是空化作用。

由于超声波具有许多特点，比如物理特性，安全性、简便性，在其过程中不会发生附带的化学反应。因此超声波技术在农业，工业以及食品行业等多行业发挥着重要的作用，同时与食品工业中的联系越来越广泛，并且展现出优越的未来前景。

本实验中使用的是超声波细胞粉碎机对黄酒酵母细胞进行破碎，超声波细胞粉碎机又名超声波协同萃取仪、超声波细胞裂解仪、超声波纳米材料粉碎机。超声波发生器和能量转换器两个主要仪器组成了超声波粉碎仪。超声波细胞粉碎机的工作原理并不如其名听起来这么神秘、复杂。简单点说就是能量的转换，把电能转化为声能，这种能量能在液体介质中形成小气泡，这些小气泡受到压力后瞬间爆裂，有很大的能量释放，为细胞破碎提供充足的能量。

超声波是物质媒介中的一种弹性机械，是一种波动的形式，因此可以利用它探测人体生理信息，即诊断超声。同时，它也是一种能量形式，当达到一定剂量的超声波在生物体内传播时，通过它们之间的能量转化，能引起生物体的结构和功能发生变化，即超声生物效应。超声对细胞的主要作用包含有热效应、空化效应和机械效应。热效应是当超声波在媒介中传播时，分子的震动被摩擦力所阻碍，使部分能量转换热能（42℃-43℃），因为正常组织的临界致死温度为45.7℃，而肿瘤组织比正常组织更为敏感，所以在此温度下代谢会发生障碍，DNA、RNA蛋白质合成会受到影响，从而把不正常组织杀死。空化效应是在超声处理下，生物体内形成气泡，随着震动气泡破碎产生机械剪切力压力，使肿瘤细胞组织坏死。此外，空化气泡破裂时间释放高温（5000℃）、高压（可达500×104Pa），使水分子解离，产生OH自由基和H原子，从而引起氧化还原反应会使部分酶失活，机械效应是超声波的原发效应，超声波在传播过程中交替的压缩与拉伸形成了压力变化，引起细胞结构发生改变。它作用的强弱与超声波的频率和强度有着密切的关系。                                                              

1.5研究的目的

近年来人们更注重健康饮食，由于白酒的酒精度比较高，酒精度偏低的黄酒越来越受人们的喜爱。黄酒工业发展速度，该行业的发展带来了大量的废弃酵母，酵母中营养物质的含量，50%左右的蛋白质，23%-28%碳水化合物，6%-8%核糖，2%B族维生素，1%谷胱甘肽以及丰富的氨基酸、矿物质，因此对破碎酵母细胞，是综合利用酵母的一种高效途径。酵母细胞膜较厚，破碎起来不是很容易，目前破碎酵母细胞的方法主要有酶法破壁、化学法破壁、物理法破壁。酶法酶制剂比较贵，而且酶解时间长，利用率比较低；化学物质的使用会加大蛋白质的损耗，而且容易引起蛋白质的变性，现实可操作性不大；单一的物理方法（如高压匀浆法、反复冻融法、超声波法）破壁效率低、同时能耗较大。 冻融协同超声波破碎黄酒酵母细胞(4):http://www.youerw.com/shiping/lunwen_62413.html