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    2.载玻片的硅烷化：将烘干的片子放入真空干燥器，加入200 L  硅烷化试剂，抽真空5 min.放置一段时间备用。3.Antithrombin III修饰的金纳米粒子的制备：将打有小孔的PDMS覆盖在修饰有巯基的载玻片上，用二次水清洗小孔三次，加入50倍稀释的金纳米粒子到小孔中，孵育15 min左右后，吸走多余的金纳米粒子，用二次水洗三次，再加入 2 mM DDA ,室温孵育至少3小时，然后用缓冲溶液清洗小孔，接着加入1 mg/mL 的Antithrombin III，同时加入适量的EDC,4℃冰箱冷藏过夜。 4.对肝素钠的检测：吸走小孔里多余的液体，用PBS缓冲液几次，取走PDMS，在载玻片上加入肝素钠，盖上盖玻片，并用指甲油固定住四周，孵育20 min,  上显微镜观察。 3.2  暗场显微成像      在EMCCD前加入透射光栅，使单个金纳米粒子的零级光斑分裂出一级条纹。参数设置：曝光时间200 ms,增益30，循环时间50 ms.
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