稀释液保存温度及稀释倍数对湖羊精液保存效果的探究(2)
1材料与方法
1.1试验动物
试验用精液采自高港西来原羊场所提供的5只优秀的湖羊种公羊。年龄2岁，身体强健无疾病，采精期间每日除常规日粮外，还增喂鲜鸡蛋。
1.2药品和仪器
药品有Optidyl稀释液原液（法国IMV进口的冷冻稀释液）、新鲜卵黄液、葡萄糖、一水葡萄糖、蔗糖、柠檬酸钠、青霉素、EDTA、生理盐水、双蒸水；主要仪器有凡士林、免吹气假阴道、显微镜。
1.3稀释液准备
用蒸馏水对Optidyl稀释液原液（标准稀释液）进行2.5倍稀释后，置于4℃冰箱中备用。试验选择了5种精液稀释液（A、B、C、D、E），具体配方参照图1[3-8]。按图1中的实验配方称取所需要的物质，溶于蒸馏水或生理盐水中。取干净新鲜鸡蛋，小心敲掉外壳，去掉蛋清，将蛋黄置于干净的容器中，备用，根据配方需求，用无菌的去针头的注射针刺破卵黄膜抽取需要的卵黄加入上述溶液中，摇匀，置于4℃冰箱备用。
成分/稀释液 A B C D E
无水葡萄糖g 3 3 3
一水葡萄糖/g 2
蔗糖/g 1.84
EDTA/g 0.59
柠檬酸钠/g 2.7 1.01 O.59 1.4 1.4
新鲜卵黄/ml 10 10 10 20
青霉素钾/万u 10 10 10
生理盐水/ml 到100
双蒸水/ml 到100 到100 到100 到100
图1
1.4采精方法
首先对人工采精的器械进行严格消毒。采精前公羊外阴部及周围用0.1%高猛酸钾溶液冲洗消毒，并用毛巾擦干。采精人员提前戴好无菌手套。其次应该注意假阴道的正确使用，假阴道内的温度应该控制在48℃左右为宜。假阴道注水调节压力，以假阴道内胎口呈Y形，即呈三个饱满瓣状表示压力合适，将凡士林涂抹至其表面及假阴道1/3-1/2处，以保证其润滑度[9]。
采精一般用发情母羊作为活畜台。将母羊固定于采精架后，将经训练调教的种公羊赶入采精现场，不要急于采精，让公羊爬跨台畜后，将其牵下，反复几次，可提高其射精量。采精员位于台畜右侧，右手持假阴道与台畜平行，假阴道开口应与公羊阴茎伸出方向倾斜度一致。在公羊爬跨台畜向前做“冲跃”动作时，采精员左手四指并拢握住包皮，将阴茎导入假阴道。待射精完毕，将采精杯一端竖立向上，先放去假阴道胎内空气，然后取下采精杯，送往处理室做精液品质检查。
公羊采精频率在配种季节每天可采1-2次，每周采5-10次，每周让羊休息1-2天[9]。
1.5湖羊精液品质检查
1.5.1色泽和气
正常的精液应该是白色或淡黄色，无或略带腥，凡呈红褐色、绿色或含大块凝固物质的精液不能使用,低倍镜下观察刚采集的精液呈翻滚的云雾状[9]。假如采集的精液色泽气不正常，应放弃使用该精液，给公羊打上标记，另采一头。