蚕豆幼苗期根系和叶片生理指标对UV-B辐射和铅镉(2)
1. 材料与方法
1.1 实验材料
市售普通蚕豆。1.2 实验方法
1.2.1 铅镉胁迫液的制备
①精密称取803.50mg硝酸铅(优级纯)，加10mL 1.0mol/L的硝酸，全部溶解后移入1000mL容量瓶中，加水至刻度，此溶液铅浓度为500mg/L。②精密称取40.62mg氯化镉(优级纯)于300mL烧杯中，加水溶解，全部溶解后移入1000mL容量瓶中，加水至刻度，此溶液镉浓度为20mg/L。
1.2.2 种子处理[11-12]
选取大小一致的蚕豆种子，氯化汞消毒15～20min后，用无菌水清洗，然后等分为4组备用。1.2.3 实验处理设计
实验设置4个组，第1组设为对照组，放入盛有适量水的培养皿中；第2组等分为3份，分别照射紫外线1d、3d、5d；第3组等分为3份，分别在铅镉溶液中浸泡1d、3d、5d；第4组同样等分为3份，分别在UV-B辐射和铅镉溶液复合胁迫下处理1d、3d、5d。第2组、第3组、第4组处理结束后，进行根尖细胞恢复培养。幼苗处理：分别选出能正常发芽的种子，待幼苗长出4～6片真叶时，用上述4个组的处理方法处理蚕豆幼苗，处理结束后使幼苗恢复生长2d，然后进行幼苗期各个生理指标的测定。
1.2.4 项目测定
①发芽率的测定：种子经过处理后，进行萌发实验，每天观察1次发芽情况，统计各个处理萌发1d、3d、5d后的发芽率。②根系活力的测定[13]：种子萌发8d后采用TTC法进行根系活力的测定。
③可溶性蛋白含量的测定[14]：采用考马斯亮蓝G-250比色法测定。
④叶绿素含量的测定：采用苏正淑[15]等的方法进行测定。
⑤丙二醛含量的测定[16]：采用硫代巴比妥酸（TBA）法测定。
⑥过氧化物酶活性的测定[17]：采用愈创木酚比色法测定。
2. 结果与分析
2.1 铅镉溶液、UV-B辐射、复合胁迫对蚕豆种子萌发的影响
表1 铅镉、UV-B辐射及复合胁迫下蚕豆的种子萌发率| 处理组 | 处理时间 | ||
| 1d | 3d | 5d | |
| CK | 100% | 100% | 100% |
| Pb＋Cd胁迫 | 100% | 98% | 98% |
| UV-B辐射胁迫 | 94% | 90% | 88% |
| 复合胁迫 | 96% | 88% | 84% |