菲牛蛭Guamerin基因的克隆和吸食对其表达的影响(2)
Guamerin是一种从水蛭[7]纯化出来的弹性蛋白酶特异性抑制剂，它由57个氨基酸残基组成, 富含半胱氨酸,相对分子质量为6110Da[8]。现有研究表明，Guamerin基因序列与任何已知的蛭类蛋白酶抑制剂没有明显相似性, 而与 Hirustansin 有51%的序列同源性；它的10个半胱氨酸残基序列显示,它与Antistasin属同一类丝氨酸蛋白酶抑制剂[9]。 人白细胞弹性蛋白酶(Human leukocyte elastase,HLE)，是人体受炎症刺激而释放出的一种破坏性丝氨酸蛋白酶。一般情况下，人白细胞弹性蛋白酶的功能活性由于抑制剂的存在而受到有效的控制而保持平衡，当弹性蛋白酶与其生理性抑制剂之间的平衡被破坏，可导致严重的组织损伤，并与多种疾病，如癌症、脓血症、胰腺炎和类风湿关节炎等的发生和发展有密切的联系[10]。因此，弹性蛋白酶抑制剂具有潜在的治疗上述疾病的价值。
吸血蛭在吸食期间，会将大量生物活性物质转移到寄主体内用来阻止伤口过早的止血和急性炎症的发生，促使吸血蛭能顺利吸食血液。目前对吸血蛭的研究主要集中在活性物质的挖掘以及药理作用方面，鲜有吸血蛭吸食阶段关键基因表达的研究。
本实验将克隆菲牛蛭的Guamerin基因，对克隆得到的基因进行同源性分析。并对不同吸食阶段的菲牛蛭的各个组织部位的Guamerin基因通过RT-PCR进行定量分析，探究吸食对菲牛蛭Guamerin基因表达的影响，同时确定菲牛蛭Guamerin基因的最佳时空表达模式。