10

3.2菌株分类鉴定 11

3.3降解菌部分生理生化特性 14

3.4最适温度 15

3.5最适pH 16

3.6 HPLC检测菌株M1对4HBA的降解程度 17

参考文献 19

致谢 21

图清单

图序号 图名称 页码

图1-1 4HBA的原儿茶酸开环代谢途径 2

图1-2 4HBA的苯甲酰-CoA还原途径 2

图1-3 4HBA脱碳酸降解途径 3

图1-4 三条龙胆酸降解途径 3

图3-1 菌株M1的单菌落 11

图3-2 菌株M1的革兰氏染色

图3-3 PCR产物 12

图3-4 纯化后的PCR产物 12

图3-5 菌株M1的系统进化树 14

图3-6 生化管的颜色变化 15

图3-7 温度对菌株M1生长的影响 16

图3-8 pH对菌株M1生长的影响 16

图3-9 菌株M1对4HBA的降解 17

表清单

表序号 表名称 页码

表2-1 使用仪器设备目录 4

表2-2 PCR反应体系 8

表3-1 菌株M1的部分生理生化特性

1绪论

近年来,由于人工石化产品的过度使用,大量工业、农业和生活废水向沿海港湾、河口排放,导致沿海地区的环境污染问题日益严重,有机毒物特别是芳香族化合物及其衍生物在环境中的积累与富集已经成为一个不可忽视的环境问题。利用微生物对有机污染物的降解作用,解决海洋环境污染问题,成本低廉且不会产生二次污染,已经成为当今海洋环境科学和工程的研究热点之一[1]。

对羟基苯甲酸(4-Hydroxybenzoate,4HBA)是一种微溶于水、易溶有机溶剂的无色结晶粉末,是自然界中常见的芳香族化合物,在木质素降解过程中起重要中间体的作用[2],也是很多有机污染物的重要中间代谢产物。自然界中通过木质素降解等方式形成或释放出来的4HBA,很快会被环境中的微生物降解,不会在自然界中大量积累。但是从上个世纪中叶开始,人类大量使用含有芳香环的石化产品,导致芳香族化合物及其衍生物在环境中大量积累,破坏生态平衡,而4HBA正是这些芳香族化合物及其衍生物的重要中间代谢物之一。此外,4HBA被广泛用于食品、化妆品、液晶聚合物、塑料、染料和医药工业[3],使得4HBA在一些工厂排放的废水中达到比较可观的浓度。由于人类活动频繁,导致向自然界中排放4HBA的速度远远大于自然净化的速度,4HBA成为一种比较常见的环境污染物。4HBA在大陆环境中过量积累会抑制农林作物生长,导致农林作物减产以及连作障碍[4]。4HBA在海洋环境中大量积累,会影响海洋细菌群落结构,降低海洋菌群丰度和多样性,危害海洋生物,破坏海洋生态平衡。因此,海洋微生物降解4HBA的研究,可以更好地理解自然界中芳香族化合物的生物降解机制,分离和培育出高效广谱的降解菌,可以应用于废水处理,环境污染物治理,为海洋环境修复提供理论依据。

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