参考文献 14

致谢 16

生物固体发酵生产纤维素酶  引言

纤维素酶不是单一的一种酶,是好多种酶系在一块起协同作用,是把纤维素分解成为葡萄糖的一类酶的总称。纤维素在地球上的资源比较富足,如果通过降解,就可以转化为很多有用的东西为我们人类所用,这对于解决全球食物难题和能源问题有非常大的意义。随着科技的发展,我们可以利用的资源越来越少,而环境的污染日益加重,寻找减少环境污染的有效途径显得越来越紧迫,源^自#优尔^文/论`文]网[www.youerw.com。由于纤维素的生产成本过高,因此,寻找高产纤维素酶的途径,提高纤维素酶的活力对一些能源的利用具有深远的意义。此次实验就是利用微生物发酵产酶的功能,通过固体培养基发酵生产纤维素酶。

1. 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 实验试材

芽孢杆菌:从土壤中筛选的芽孢杆菌SC1。

1.1.2 主要培养基

活化芽孢杆菌用的LB培养基:牛肉膏5g,蛋白胨10g,氯化钠5g,pH 7.4,水1000 mL;

产酶培养基1号:小麦麸皮5g,玉米粉5g,羧甲基纤维素钠0.2g,硫酸铵0.1g,磷酸氢二钾0.005g,尿素0.2g,碳酸钙0.05g;

产酶培养基2号:小麦麸皮3g,玉米粉7g,硫酸铵0.05g,磷酸氢二钾0.01g,尿素0.1g,碳酸钙0.07g,硫酸镁0.02g;

产酶培养基3号:小麦麸皮7g,玉米粉3g,羧甲基纤维素钠0.1g,硫酸铵0.15g,磷酸氢二钾0.02g,尿素0.05g,碳酸钙0.02g,硫酸镁0.01g。

筛选培养基:羧甲基纤维素钠20g,磷酸氢二钠2.5g,磷酸二氢钾1.5g,蛋白胨2.5g,酵母膏0.5g,琼脂20g,水1000mL,pH:7.0~7.2。

上述所有培养基的灭菌条件统一为:121 ℃,0.1 MPa,15 min。

1.1.3 试剂

(1)DNS试剂:准确称取3,5-二硝基水杨酸10 g,溶于600 mL水中,然后加入氢氧化钠10 g,在水浴中用玻璃棒搅拌溶解,水浴温度是50 ℃,然后再按顺序加入酒石酸钾钠200 g,苯酚2 g,最后加入无水亚硫酸钠5 g,等到完全溶后,放置恢复到室温。然后加入蒸馏水,接着用用1000 mL的容量瓶定容,最后又经过滤。最后把它保存在棕色试剂瓶中,放在暗处1天后再使用。

(2)葡萄糖标准贮备液:称取葡萄糖1 g后加入蒸馏水,用玻璃棒充分搅拌溶解,源^自#优尔^文/论`文]网[www.youerw.com,然后用100 mL的容量瓶定容。

(3)羧甲基纤维素钠溶液(CMC-Na):用天平准确称取羧甲基纤维素钠0.80g,然后用量筒量取乙酸—乙酸钠缓冲液90mL,然后倒入烧杯中,在磁力搅拌器上将称取的羧甲基纤维素钠缓慢的加入烧杯中,目的是为了是让羧甲基纤维素钠充分溶解。最后定容是用乙酸—乙酸钠缓冲液,定容到100mL。将配好的羧甲基纤维素钠溶液在4度冰箱避光保存,有效期为3天。

(4)pH为5.0的柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液:准确称取磷酸氢二钠7.164 g,用100mL的容量瓶加入蒸馏水定容,即为0.2 mol/L的A液。准确称取柠檬酸2.101 g,加水定容至100 mL,即为0.1 mol/L的B液。然后取A液51.5 mL,B液48.5 mL混合,即为所需缓冲液。

上一篇:小麦COX VII a序列特性及进化分析
下一篇:高粱Trihelix转录因子的分子特征与表达分析

垃圾填埋过程H2S气体减排...

Rhodotorulasp.发酵生产类胡萝卜素及提取的研究

脱脂蚕蛹培养产油微生物...

Rhodotorulasp.发酵生产类胡萝卜素的动力学研究

欧文氏杆菌发酵生产氨基葡萄糖的动力学研究

加拿大一枝黄花内生菌发...

产1-DNJ菌株的筛选鉴定及其...

C#学校科研管理系统的设计

公寓空调设计任务书

医院财务风险因素分析及管理措施【2367字】

承德市事业单位档案管理...

志愿者活动的调查问卷表

10万元能开儿童乐园吗,我...

神经外科重症监护病房患...

AT89C52单片机的超声波测距...

国内外图像分割技术研究现状

中国学术生态细节考察《...