海洋微生物降解低分子木质素化合物的研究(2)
2.材料与方法 2.1 材料及器具 海底泥、香草酸粉末等各种上海生工购买的试剂、培养皿、锥形瓶、离心管、离心机、高压蒸汽灭菌锅、烘箱、超净工作台、分光光度计、载玻片、显微镜、DNA提取试剂盒、微波炉、电泳仪、PCR 仪、PCR 产物纯化试剂盒、生化管等。
2.2 方法 2.2.1海水培养液 A液： NaCl 22.79 g， Na2SO4 3.98 g， KCl 0.72 g， NH4Cl 0.27 g， Na2HPO4·12H2O 0.119 g，NaBr 0.083 g，NaHCO3 0.031 g，H3BO3 0.027 g，NaF 0.0026 g，TAPSO 1.3 g，蒸馏水定容至 890 ml，调节 pH至7.6，使用前121 ℃，20 min 高压蒸汽灭菌；B 液：MgCl2·6H2O 11.18 g，CaCl2·2H2O 1.46 g，SrCl2·6H2O 0.024 g，加蒸馏水定容至100ml，使用前121 ℃，20 min高压蒸汽灭菌；C 液：FeCl2·4H2O 2 g，加蒸馏水定容至 100 ml，使用前过滤灭菌。海水培养液由 A、B、C 液按照890:100:10 的比例混合而成。 2.2.2营养培养液 89 ml的A液， 10 ml的B液混合后加入0.2 g胰蛋白胨、 0.1 g酵母粉， 121 ℃，20 min高压蒸汽灭菌后，加入 1 ml C 液。
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