大麦抗纹枯病种质资源的筛选(2)
本项研究在对大麦种质资源初选的基础上，选取不同地区的大麦种质，进行育苗培养，然后将扩大繁殖的纹枯菌接种至麦苗基部进行侵染，通过统计病斑高度，进行病情等级分析，对大麦种质的抗病性进行筛选，从而为纹枯病的研究及抗病品种的培育提供依据，也为其他作物病害研究提供借鉴意义。
1 材料与方法
1.1 实验材料
实验材料均引自浙江省农业科学院，大麦种质材料共31份（如表1），分别采自不同地区。大麦纹枯病的病原菌主要以禾谷丝核菌(Rhizoetonia cerealis)为主,其次为立枯丝菌(R.solani)[3]。用于接种侵染的菌种为麦类作物纹枯病发生地采集并分离所得的禾谷丝核菌。
采用马铃薯葡萄糖琼脂培养基（Potato Dextrose Agar （Medium），PDA）对其进行扩大继续培养。
表1：供试材料
Table 1 List of barley germplasm materials
序号
No. 编号
Code 序号
No. 编号
Code 序号
No. 编号
Code 序号
No. 编号
Code
1 C3 9 C45 17 C69 25 C128
2 C20 10 C46 18 C70 26 C132
3 C22 11 C52 19 C72 27 C134
4 C31 12 C55 20 C77 28 C135
5 C32 13 C56 21 C89 29 C145
6 C33 14 C57 22 C94 30 C156
7 C36 15 C65 23 C95 31 C158
8 C40 16 C66 24 C121
1.2 实验仪器及试剂
仪器设备：恒温鼓风干燥箱、、电炉、光照培养箱、高压蒸汽灭菌锅、恒温培养箱、超净工作台、酒精灯、三角瓶（或茄子瓶)、培养皿、接种环、搪瓷盆、纱布、普通专用喷雾器或医用喉头喷雾器等。
实验试剂：30%双氧水、琼脂、葡萄糖、1000X大麦营养液等。
1.3 实验方法
接种鉴定的技术规程包括育苗、接种体的制备及接种3个环节。为了更加方便快捷的进行抗性鉴定，增加实验结果的可靠性，本研究采用的是人工接菌鉴定。
1.3.1大麦种子的暗处理
常见的大麦种子的消毒法主要有温汤浸种（物理方法,45～50℃、3h）、1%HCLO消毒、次氯酸钠-乙醇消毒[4]（5.25%次氯酸钠:95%乙醇=1:1，30—45秒）,以及H2O2消毒（化学方法）等。本项研究采用H2O2消毒。
将育苗盘洗净，控干，盘底部铺上一层滤纸，备用。精选每种大麦饱满种子约15~20粒，表面用3%双氧水消毒约3分钟左右后用蒸馏水冲洗3遍，滤干，按顺序均匀排列分装在育苗盘中，作三个平行组，再将其置于托盘中，加入蒸馏水，使每个方格槽内的滤纸浸湿源`自,优尔`文.论"文'网[www.youerw.com，勿使麦粒漂浮于槽内。再用厚报纸盖住遮光（暗处理），室温下催芽，定期往托盘内加水保湿，并及时更换托盘内的水，防止变臭。同时观察种子的发芽情况，及时处理发霉染菌的大麦粒。