摘要：双螺旋DNA检测在遗传性疾病的诊断和治疗中具有重要的意义。因此，开发一种快速、灵敏的可以检测双螺旋DNA的方法至关重要。在这里，我们利用正电性金纳米粒子与DNA双螺旋模板结合可以快速沉降的原理，实现了双螺旋DNA的高灵敏检测。目标双螺旋DNA存在时，两个发卡探针可以被打开，从而形成长的双螺旋DNA模板，正电性金纳米粒子可以吸附到双螺旋DNA的表面，从而由于金纳米粒子密度的增加而沉降。并且双螺旋DNA模板的多少与目标双螺旋DNA 的浓度呈正比。因此，通过测定金纳米粒子溶液上层清液中金的浓度，实现对双螺旋DNA的高灵敏检测。在最佳的实验条件下，可实现双螺旋DNA在100 pmol/L-2.0 nmol / L浓度范围的高灵敏检测，该方法检测限为33 pmol/L。51843

毕业论文关键词：正电性金纳米粒子，杂交链式反应

Ultrasensitive double stranded DNA detection by using hybridization chain reaction

Abstract: Double stranded DNA is directly related to many diseases. Therefore, developing a rapid and sensitive method for double stranded DNA detection is very important. Here, an ultrasensitive sensor for double stranded DNA detection was developed based on the precipitation of positively charged gold nanoparticles after the adsorption of them with double stranded DNA strands. Positively charged gold nanoparticles can adsorb with double stranded DNA (dsDNA) and induced the precipitation of them, and the degree of gold nanoparticles precipitation was proportional with target dsDNA concentration. Therefore, based on detecting the concentration of gold nanoparticles concentration in mixed solution, dsDNA could be detected in the range from 100 pmol/L to 2.0 nmol/L, with a detection limit of 33 pmol/L. 

Keywords: Positively charged gold nanoparticles; hybridization chain reaction.

目录

前言 1

1 材料与方法 1

    1.1 仪器与试剂 1

1.2双链DNA（T）的杂交 2

1.3比色法测定双链DNA的试验步骤 2

2 结果与讨论 2

2.1 实验原理 2

2.2 紫外-可见吸收光谱分析 3

2.3 金纳米粒子电位考察 4

2.4 方法的灵敏度和选择性 5

3 讨论 6

致谢 7

参考文献 7

前言

双螺旋DNA检测在遗传性疾病的诊断和治疗方面具有相当重要的意义。在酸性条件下，双螺旋DNA可与第三条同聚嘧啶链或同聚嘌呤链（TFO）通过hoogsteen氢键或反hoogsteen氢键形成平行或反平行三螺旋DNA[1-5]，通过形成三螺旋DNA的方式实现多目标双螺旋DNA的定量检测。源`自·优尔.文/论:文'网,www.youerw.com

分子信标是1963年由Tyagi和Kramer首次提出的具有发卡型结构的单链DNA[6]。其与目标分子结合后，会经历从茎-环结构到线性结构的转换。并被广泛应用于DNA[7-11]、RNA[12,13]、蛋白质[14-17]、金属离子[18-21]和小分子[22-24]的检测。传统的分子信标根据两端标记的分子不同，主要分为荧光分子信标和氧化-还原分子信标两大类。荧光分子信标和电化学分子信标分别在茎-环结构的两端标记荧光分子-淬灭分子[25,26]和氧化-还原单元[27,28]，该类分子信标在合成的过程中需要经历复杂、昂贵的生物标记过程，不易合成和纯化，因此其应用受到了一定的限制。