腺苷也是虫草的活性成分,被认为是虫草的质量控制指标[13],其分子式为C10H13N5O4,如图1b,腺苷的分子结构式中含有腺嘌呤和五碳糖,是一种嘌呤核苷,熔点为234-236℃,溶于甲醇、乙醇等有机溶剂。其主要功效为:参与心肌能量代谢、抑制中枢神经元的兴奋性、降低血压、抗人血小板聚集作用等[14]。同时,它还能转移能量和进行信号传递,可以作为抑制性神经传导物,促进睡眠。
图1 虫草素(a)和腺苷(b)分子结构式
北虫草的功能食品有很多[15-16],如虫草饮料[17-18]、虫草含片[19]、虫草茶等。而虫草酒,因其有增强心肌收缩力、延缓衰老、改善心血管等功效[20],以及适合各年龄阶段人的需求,所以有着很好的市场前景。但虫草酒随着保存时间的延长,酒中的活性成分及色泽都会发生变化,从而影响酒的商品价值。本实验进行了虫草酒稳定性的研究,旨在延长保存时间,提升虫草酒的价值。
2 材料方法
2。1 北虫草
由淮安市食品组分与功能食品重点实验室提供。将采收的新鲜北虫草,45℃烘干,粉碎,过100目筛,收集于棕色瓶中,4℃冰箱保存备用。
2。2 基酒论文网
由江苏今生缘酒业有限公司提供的高档国缘酿造原浆酒。
2。3 试剂药品
腺苷(JS91193)和虫草素标准品(JS91028)标准品购自上海金穗生物科技有限公司、乙腈(色谱纯)。
2。4 仪器和设备
高效液相色谱仪(Agilent1260)、粉碎机、超速离心机(Optima L-80XP)、微孔滤膜(0。45µm,水相)
2。5 方法
2。5。1 虫草酒的配制
取处理好的虫草粉分别按照下列两种方案配制虫草配制酒:
方案1:分别将 5、10、15、20g虫草加入500mL的40%vol的酒中浸泡;
方案2:分别在500mL的酒度(%vol)为:30、40、50、60、75基酒中加入5g的虫草浸泡。
2。5。2 虫草酒的评价方法
(1)感官评价法,委托15位今世缘酿酒研究院品酒员从色、香、味、格4方面对酒进行评价,从中选出最佳。
(2)HPLC法,采用HPLC检测配制酒中活性成分腺苷和虫草素的含量。
2。5。3 虫草配制酒稳定性研究
将浸泡过滤后的配制酒分别放在阳光直射下(窗台)、散射光下(室内台面)和遮光(纸板箱)3种情况下。(1)隔20d,100d,500d观察配制酒的稳定性,即通过色度和是否有沉淀物来评价。(2)检测不同保藏天数的虫草酒,测出其中虫草素和腺苷的含量。
2。5。4 检测方法文献综述
虫草素、腺苷含量检测采用HPLC法[21-23],具体操作过程为:
(1)流动相配制:将乙腈和水以5:95的比例混合,用0。45µm的滤膜进行过滤,最后超声脱气。
(2)虫草素和腺苷标准溶液的配制:称取虫草素和腺苷标准品各10mg,用流动相定容至100ml,摇匀。
(3)标准曲线的绘制:分别吸取0。1ml、0。2ml、0。5ml、1。0ml、2。0ml、5。0ml的混合标准溶液加入10ml容量瓶中,定容,摇匀,过滤后高效液相色谱仪进行检测。以浓度为横坐标,相应峰面积为纵坐标,绘成标准曲线。
(4)样品的检测:将虫草酒过0。45µm的滤膜,滤液进行高效液相色谱法测定。
(5)结果计算。