因此本研究将采用饮用加药溶液的方法建立小鼠IBD模型,分别喂饲三种浓度梯度的VitB12衍生物,检测IBD小鼠的DAI评分、大肠炎症指数、有机酸的种属与含量,以探究VitB12衍生物对小鼠肠炎作用及其可能的作用机制,为IBD的临床治疗提供可靠的理论依据。
2。材料和方法
2。1动物
购买于SLAC研究动物公司(上海,中国)的雄性C57BL/6J 小鼠(8周)。小鼠被放置于学校动物房,动物房内控制室温在22°C、相对湿度50%以下、鼠笼内的空气已过滤,12h黑暗/光明一个循环,喂食动物房里的小鼠饮用水和标准的实验室小鼠食物。在实验开始前,小鼠在动物房内要适应5天。所有动物相关的实验条款是根据动物的照顾和上海第十人民医院的使用委员会(2011-RES1)。
2。2结肠炎的诱发和治疗文献综述
60只小鼠随机分成10组:1。对照组(CN):小鼠正常饮水(试验中小鼠饮水均为超纯水);2。IBD组:小鼠喂食5%DSS溶液;3。IBD+VitB12衍生物低浓度氰钴胺组:喂食5%DSS溶液+低浓度(0。0125mg/L)氰钴胺;4。IBD+VitB12衍生物氰钴胺中浓度组:喂食5%DSS溶液+中浓度(0。125mg/L)氰钴胺;5。IBD+VitB12衍生物氰钴胺高浓度组:喂食5%DSS溶液+高浓度(1。25mg/L)氰钴胺;6。IBD+VitB12衍生物甲钴胺低浓度组:5%DSS溶液+低浓度(0。0125mg/L)甲钴胺;7。IBD+VitB12衍生物甲钴胺中浓度组:5%DSS溶液+中浓度(0。125mg/L)甲钴胺;8。IBD+VitB12衍生物甲钴胺高浓度组:5%DSS溶液+高浓度(1。25mg/L)甲钴胺;9。氰钴胺高浓度组:喂食高浓度(1。25mg/L)的氰钴胺;10。甲钴胺高浓度组:喂食高浓度(1。25mg/L)的甲钴胺。开始实验第一天给所有组的小鼠喂食灭菌的双蒸水。第2、3天除了对照组外,剩下九组小鼠都喂食5%DSS溶液,为了诱导肠炎的发生。在小鼠患上肠炎以后,第4、5、6天除了对照组小鼠继续喂水、IBD组小鼠继续喂5%DSS溶液外组3、4、5、6、7、8喂5%DSS溶液和相应浓度的VitB12相应的衍生物,高浓度VitB12衍生物组喂高浓度的VitB12相应的衍生物。第7天,全部组小鼠喂食双蒸水。第8天处死小鼠,取小鼠眼珠血并解剖小鼠取小鼠结肠、大肠组织并测量结肠的长度。用4%的中性甲醛溶液清洗结肠的表面狗,将结肠组织一部分固定在4%的中性甲醛溶液中用于形态学诊断,剩余部分储存在液氮中以便更久的研究。大肠组织冻于-4°C冰箱。