摘  要目的 通过检测小鼠脂肪组织中自噬相关基因 (组织蛋白酶B(CTSB)、溶酶体膜蛋白LAMP1、多聚泛素结合蛋白SQSTM1和转录因子TFEB )mRNA的表达, 分析膳食蛋氨酸限制（MR）对脂肪组织自噬的影响，为探讨膳食蛋氨酸延缓衰老的分子机制提供依据。  方法雄性C57BL/6小鼠用正常浓度蛋氨酸饲料（0。85% w/w）（对照组）和低浓度蛋氨酸饲料（0。17% w/w）（蛋氨酸限制组）喂养12周，收集小鼠的附睾脂肪组织，提取RNA、逆转录、通过定量PCR检测mRNA表达水平,用Mann-whitney检验比较两组间表达水平差异。结果 与对照组相比，膳食蛋氨酸限制组小鼠附睾组织中，CTSB和LAMP1 mRNA在表达水平显著性升高（P＜0。05）；SQSTM1和TFEB的mRNA表达量也有所增加，但没有统计学差异。结论：膳食限制蛋氨酸可能增加脂肪组织的自噬。89565

Abstract Object To investigate the effects of dietary methionine restriction (MR) on autophagy in adipose tissue by detecting the expression of autophagy-related genes (lysosomal protein CTSB, protein LAMP1, SQSTM1 and TFFB mRNA) in adipose tissue, and to further study the effects of methionine Effects of dietary restriction on adipogenesis in adipose tissue。  Method Male C57BL / 6 mouse were fed with normal concentration of methionine diet (0。85% w / w) and control group (0。17% w / w) (MR group) for 12 weeks。 The expression of mRNA in the epidermis of mouse was detected by mRNA and reverse transcription。 The expression level of related genes was detected by quantitative PCR。 The expression level of the two groups was compared by Mann-whitney test。 Result Dietary methionine compared to the control group concentration of dietary methionine concentration limits group, CTSB, mRNA LAMP1 has increased significantly (P <0。05) in the expression; SQSTM1, the expression of mRNA TFEB exhibit enhanced tendency。 Conclusion Dietary restriction of methionine can increase adipogenesis in adipose tissue

毕业论文关键词： 膳食蛋氨酸限制； 脂肪组织； 自噬； 定量PCR

Keyword:  Methionine restriction；Adipose tissue； Autophagy； Quantitative PCR

目  录

1 引言 4

2 材料与方法 4

2。1主要试剂 4

2。2主要仪器 5

2。3方法 5

2。3。1 实验样品来源 5

2。3。2 实时荧光定量PCR检测 5

2。3。2。1 RNA提取 5

2。3。2。2 RNA质量检测 6

2。3。2。3逆转录 5

2。3。3荧光定量PCR 6

2。3。4整理PCR实验数据 7

2。3。5 引物序列 7

2。3。6统计学方法 7

3。结果 7

3。1实验小鼠体重变化结果 7

3。2 RNA定量检测结果 9

3。3实时荧光定量PCR检测结果 10

4 讨论 13

5 结论 14

参考文献 14

致  谢 15

1 引言源Q于W优E尔A论S文R网wwW.yOueRw.com 原文+QQ75201,8766

由于现代科技不断快速的发展，人口老龄化的速度不断加快，老龄化带来了许多负面影响，数据表明，由于人口老龄化的发生使疾病谱发生了很大程度的改变 , 有80%左右的老年人口至少患有一种慢性病 , 这使得他们比健康人更需要关心。我国也正面临着人口老龄化社会所带来的一系列影响，老年人群的健康问题，成为我国一项重大的有待解决的社会与经济问题。肥胖和肥胖导致的一系列并发症是影响老年人健康的重要问题，肥胖症患者，患心血管疾病 (如冠心病、高血压)和糖尿病的危险性明显升高,严重地影响了人们的生活质量，患者的寿命也因此相应缩短。老年肥胖病因有许多方面：膳食因素、活动不足、体质因素、药物影响、疾病影响、环境影响等[1]。因此，提高老年人的生活质量，预防老年人肥胖，探求延缓衰老的作用机制，已成为医学界一个迫在眉睫需要解决的重要需求。