毕业论文

打赏
当前位置: 毕业论文 > 医学论文 >

双鼠李糖脂对癌细胞的抑制作用的研究(7)

时间:2017-02-16 16:50来源:毕业论文
b).用排枪吸走旧培养液后,加入不同浓度的双鼠李糖脂,分别为10、100、120、140、160、180、200gmL-1,依据实验需要在37℃,5% CO2培养箱中培养48h,以无细胞的


b).用排枪吸走旧培养液后,加入不同浓度的双鼠李糖脂,分别为10、100、120、140、160、180、200μg•mL-1,依据实验需要在37℃,5% CO2培养箱中培养48h,以无细胞的培养液为对照组;
(5)MTT检测:每孔加入20μL MTT,(5mg•mL-1,即0.5% MTT)培养4h,结束培养后用排枪小心吸走培养液,每孔加150μL DMSO,摇床低速振荡10min使结晶物溶解,再用酶标仪在波长490nm处测各孔的吸光值,记录结果
2.2.4 MIC实验
MIC实验采用的是微孔板法
1 配制LB培养基,并接种6种供试菌,37℃摇床培养1d,作为种子液;
2 取5ml菌悬液,稀释10倍,供下步使用;
3 无菌水配制浓度为5000、3000、1000、500、400、300、200、100、50µg/ml的单、双鼠李糖脂溶液;
4 往灭过菌的96孔板中依次加入20µl上述药物,无菌操作,再各加入180µl 菌液,混匀后,设置阴性对照和空白对照,放入摇床继续培养12h;
5 用酶标仪测定其600nm的OD值。 
3 结果和讨论
3.1 MTT结果讨论
3.1.1 单鼠李糖脂
 
图3 单鼠李糖脂抗肿瘤活性
由图3知,单鼠李糖脂浓度为100µg/ml-150µg/ml时,随着浓度的升高,A549、H460、HepG2的存活率降低,但对MCF-7细胞无明显抑制作用。相同浓度的单鼠李糖脂对细胞H460的抑制效果最明显。
3.1.2 双鼠李糖脂
 图5 双鼠李糖脂抗肿瘤活性
由图5知,双鼠李糖脂浓度在100µg/ml-200µg/ml时,随着双鼠李糖脂浓度的升高,细胞的存活率降低,且在浓度超过200µg/ml时,细胞基本不生长。
3.2 IC50浓度值
根据各组分浓度与细胞存活率的关系,可通过IC50计算软件计算出各组分物质对各种细胞的IC50 浓度。见表3
表3 各物质对肿瘤细胞的IC50浓度值(µg/ml)
    A549    HepG2    H460    MCF-7
单鼠李糖脂    143.14    99.43    112.99    /
双鼠李糖脂    175.90    143.21    150.68    125.15
注:/ 代表IC50大于200µg/ml
根据表3我们可知,在对比单鼠李糖脂和双鼠李糖脂的IC50时,单鼠李糖脂的值比双鼠李糖脂的值要小,说明在较小浓度下就可以抑制一半肿瘤细胞,单鼠李糖脂较双鼠李糖脂效力高。但是双鼠李糖脂对表中的四种肿瘤细胞均有IC50值,这比单鼠李糖脂的范围更广。结果跟我们预测的双鼠李糖脂可能较小的结论不太一致。这可能是我们提取的双鼠李糖脂不是太纯导致,所以下一步要提取更纯的双鼠李糖脂。 双鼠李糖脂对癌细胞的抑制作用的研究(7):http://www.youerw.com/yixue/lunwen_3060.html
------分隔线----------------------------
推荐内容