2.2.6  倒置显微镜观察细胞形态 9

2.2.7  DPPH自由基清除活性试验 9

2.2.8  划痕实验 9

2.2.9  流式细胞仪检测细胞周期分布 10

2.2.10 数据分析 10

3.结果与分析

3.1  对A549细胞形态和数量的影响 11

3.2  对A549细胞迁移的影响 11

3.3  DPPH自由基清除活性实验测曲克芦丁清除率 11

3.4  流式细胞仪检测细胞周期分布 11

讨论 12

谢   辞 12

参考文献 13

1.引言

1.1  肺癌

    肺癌（Lung Cancer）是当今威胁人类最严重的一种肿瘤疾病，它凭借着高发病率和死亡率独占榜首【1，2】。肺癌的形成至今我们都不能清楚了解，大量资料表明，主要是肺腺癌发病率最高，同时也最难治疗，所以我们有必要研究对肺癌细胞的生长周期以及抑制作用。

现在癌症的治疗方法主要有：手术治疗，化学治疗，放射线治疗这三种。

现在我们医学上主要以化学治疗为主，配合手术。现在的药物对癌症细胞有作用但是不是特别明显。所以现在我们找到对癌症细胞有抑制作用的药物至关重要。

1.2  A549细胞    

     A549细胞是II型肺泡上皮细胞【3】,可以进行连续体外培养。它不仅有上皮细胞的特征，还具有恶性肿瘤的特征【4，5】，所以我们以肺腺癌A549细胞为细胞模型，检测其受药物影响的增殖和迁移的影响，为临床肺腺癌的治疗提供理论依据。目前治疗癌症的药物大多都有较强的毒性，因此我们要不断去发现新的药物来治疗癌症。源`自·优尔.文/论:文'网,www.youerw.com

1.3细胞增殖

  细胞增殖对细胞有着重大的作用，有丝分裂。无丝分裂和减数分裂是细胞分裂的基本方法。成熟体仍然要进行细胞增殖,替代死亡的细胞,保持细胞的数量平衡。细胞增殖能够治理机体创伤和病理组织修复等其他细胞疾病。

1.4  黄酮类化合物 曲克芦丁

     曲克芦丁属于生物黄酮类,在自然界广泛存在的,是人们生活不可缺少的重要部分，在医学上经常用于治疗心血管疾病[6]。医学研究表明曲克芦丁可以防止血管内血栓的形成，成功疏通人体血管的阻塞【7】。分子生物学表明，曲克芦丁对癌细胞扩散、增殖有极大的抑制作用，所以我们以曲克芦丁为模板，研究其对肺癌A549细胞的抑制活性。

1.5  氧化压力与肿瘤

我们取曲克芦丁培养液上清液来实验，通过一系列操作测得上清液中曲克芦丁的清除率，来说明曲克芦丁对A549细胞的作用【8】。

1. 6  细胞周期

     是细胞在有丝分裂方式下，从亲代到子代，分裂结束的这一过程。这一过程反复进行，可分为若干阶段，即G1期,S期 ,G2期和M期【9，10】。

     在分裂过程中，DNA随着阶段不同，的含量也不相同，G2、M期为G0、G1期的两倍,S期则在两者之间，因此通过PI标记，可得出细胞在不同阶段的DNA含量情况。