而Keiji Numata和Peter James Baker在低聚酪氨酸-赖氨酸之后通过引入多巴胺(DOPA)成功得到带多巴胺的低聚氨基酸。[21]且根据合成时候PH的不同,得到的低聚肽-多巴胺有着更多不同的性,这可作为具有一定功能性的低聚肽,使肽基材料有了更广阔的空间。
目前为止,蛋白酶催化肽的合成被发现存在的一个潜在的缺点是合成的肽是混合的肽,并且混合的序列分布和混合的链长也是混乱的,故进来人们都在利用各种方法对低聚肽的链长和分子量的分布进行改良。
2 正文:
2.1 研究目标
氨基酸是含羧基和氨基的一类化合物统称,是生物功能大分子蛋白质的基本单位,是构成动物营养所需蛋白质的基本物质。
近些年发现,低聚氨基酸在医药和饮食方面,特别是牛奶,有着广泛的用途和潜在应用价值,其聚合度分布的最高峰是8~9左右,然而其聚合度分布却仍然比较广。故到目前为止,低聚氨基酸最大的缺陷在于其分子量不高而分布较宽,且分离困难,实际应用过程中比较受限制。因此,我们想通过主要控制一些聚合条件来调节分子量分布。由于我们旨在以绿色低毒为前提下进行反应,故选用在水溶液环境下进行对氨基酸的低聚。
反应图解如下 酶催化氨基酸低聚
2.2 研究内容
低聚氨基酸由于其生物方面的应用越来越广,得到了越来越多人的关注。但是之前,无论是利用固相聚合还是气相聚合,都会使用有毒的试剂,且后处理费用比较大。为了在绿色环保的条件下反应,我们采用水溶液为介质,使氨基酸溶解在水中,并且使反应也于水中进行。故我们采用了几种水溶性比较良好的氨基酸——谷氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸和赖氨酸等几种氨基酸。而后我们采用选择性比较低而催化活性比较高的木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶,这两种酶的水溶性也良好。酶催化氨基酸聚合之后,其低聚物在水中形成絮状沉淀,可离心去除上层清液并取下层沉淀,使水和酶与低聚肽分离开来。来!自-优.尔,论:文+网www.youerw.com
由于采用氨基酸直接低聚得到的产物经过检测后无论是产率还是聚合度都比较低下且分子量分布比较分散,故我们采用水溶性依旧优良的谷氨酸二乙酯、亮氨酸乙酯、苯丙氨酸甲酯等来代替直接使用氨基酸。由于氨基酸之间直接形成酰胺键比较困难,活性比较低,故利用酯的氨解代替了酸的氨解,令反应更加正向进行,反应更加彻底。从而使低聚氨基酸的分子量更高,产率更高,分子量分布更加均一。
氨基酸直接聚合和氨基酸酯的间接聚合的区别
我们同时测定了蛋白酶催化不同种类的氨基酸的多聚。由于不同的氨基酸,其电子效应,空间位阻效应等不一样,所以使他们相互之间不易聚合,从而聚合度很难达到很高,且产率比较低下。所以我们尝试利用相似的水溶性的氨基酸酯,并调节到适宜条件,来检测是否能够利用酯的氨解间接形成酰胺键的方法,提高蛋白酶催化下的低聚多元氨基酸的聚合度和产率,并减小它的分散度。
蛋白酶催化合成氨基酸低聚物的探索(4):http://www.youerw.com/cailiao/lunwen_81277.html