利用具有羰基还原酶转化活力的全细胞进行羰基化合物的手性还原反应具有众多优势。全细胞催化是利用完整的生物有机体作为催化剂进行化学转化，本质上是利用细胞内的酶来进行反应。在这个反应体系内，细胞中各酶系保持稳定的状态和特定的酶系且细胞内完整的多酶体系可以实现酶的级联反应，从而弥补催化过程中的不足，提高催化效率，节约反应体系的经济成本。

常压室温等离子体(简称ARTP)诱变技术的射流温度为25 ℃-35 ℃，其诱变条件通常为功率220 W及氦气气流量10 L/min。它通过发射均匀且粒子丰富的等离子体射流，使活性粒子透过细胞膜作用于DNA引起DNA的多样损伤，当细胞中DNA进行不完全修复时易形成遗传性状变化的突变株。该诱变方式对于环境和人均无危害，设备简单易于操作，与生物大分子和细胞作用明显，同时有独特的SOS修复机制[2]，由于ARTP在诱变过程中不需要采用复杂和昂贵的真空系统，己经成为诱变领域的研究热点。本实验通过ARTP诱变技术对菌株雅致放射毛霉（Actinomucor elegans）H2进行诱变处理，目的是提高该菌体中羰基还原酶的产量或减少某一种同工酶的产量，以获得高纯度的单一手性的产物(S)-CPMA。并对此高产突变菌株进行筛选培养检测，保存羰基还原酶活力强的菌株，为该菌株的工业应用作前期研究探讨[4]。 

1  材料

1。1  仪器 

ARTP诱变育种机         思清源生物科技有限公司 

紫外分光光度计          上海光谱仪器有限公司 

高速冷冻离心机          日本日立公司 

生化培养箱              上海悦丰仪器仪表有限公司 

高效液相色谱仪          美国Agilent公司 

超净台                  苏州净化设备有限公司 

恒温摇床                太仓市实验设备厂 

1。2  试剂文献综述

葡萄糖，酵母粉，蛋白胨，琼脂粉，磷酸氢二钾，PBS缓冲液，生理盐水，底物(4-氯苯基)(吡啶-2-基)甲酮。

1。3培养基配方

富集培养基(I, g/L): 葡萄糖50，酵母膏20，(4-氯苯基)(吡啶-2-基)甲酮（CPMK）10。（具体步骤：取0。1 g CPMK加入1 mL甲醇配置底物溶液，然后在每10 ml发酵富集培养基加入1 mL底物溶液）[5]。

发酵培养基（液体）(II, g/L)：葡萄糖50，酵母膏20，磷酸氢二钾4，七水合硫酸镁1。5，调pH 6。0。

YPD 培养基（斜/固）(III，g/L)：酵母膏10，蛋白胨20，葡萄糖20，定容至1 L，加入20 g琼脂粉则成为固定培养基[6]。

丰富平板培养基（IV，g/L）：葡萄糖25，酵母膏10，磷酸氢二钾4，七水合硫酸镁1。5，琼脂条20，调pH 6。0。