芦苇叶片可溶性总酚的提取和含量测定(3)
时间:2018-05-10 21:12 来源:毕业论文 作者:毕业论文 点击:次
1.4可溶性酚类化合物的性质 酚是羟基直接连在芳环上的化合物，根据酚分子中芳环的不同，可分为苯酚、萘酚、蒽酚等根据分子中羟基数目又可分为一元酚、二元酚、多元酚。。植物多酚对多种细菌、真菌及酵母菌有明显的抑制作用, 尤其对霍乱菌( Vibrio cholerae)、金黄色葡萄球菌( S taphy lococcus aureus)和大肠杆菌(E scherichia coli)等常见的致病菌有很强的抑制能力。Kuete 等报道 ,山榄科( Sapotaceae) 植物Tridesmostemon omphalocarp oides 的茎皮提取物对2种酵母菌和7种细菌有抑菌作用, 该提取物中具有抑菌活性的有效成分主要为生物碱类、类固醇类、单宁酸、多酚类及黄酮类等成分。 1.5可溶酚类化合物的提取分离方法 1.5.1有机溶剂提取法 有机溶剂提取法，这是目前国内外使用最广泛的方法。常用的有机溶剂主要有甲醇，乙醇，石油醚等。由于甲醇，石油醚毒性大，挥发性大，因此一般采用乙醇作为萃取剂。采用溶剂提取酚的传统方法有：浸渍法，渗漉法，回流提取法等。本次实验则采取回流提取法，需要采用回流加热装置，以免溶剂挥发损失，在圆底烧瓶上连接回流冷凝器。此方法较其他方法效率较高，提取成分也比较全。 1.5.2新兴的提取法 比较新兴的方法有：微波辅助提取法，超声波辅助提取法，超临界流体萃取法，生物提取法等。 1.5.3传统分离提取法 传统分离法主要有溶剂分离法，沉淀法，盐析法，结晶法等。这些方法需要设备较为严格，且提取不纯，提取量也很少。 1.6酚类化合物的分析检测 1.6.1分光光度法 目前使用较广的事络合-分光光度法，且有重复性好，准确，简便，易掌握和不需要复杂仪器设备等优点，是最常规的分析方法。其过程为，先把被测样品用乙醇溶解配成一定浓度，再加入一定量的NaOH和福林酚试剂络合，以乙醇为标准溶液，在波长为760nm处测定。这样避开了叶绿素等杂质的干扰，从而建立不同吸光度关系的回归方程，结果稳定可靠，操作简单。 1.6.2薄层色谱法 薄层色谱分离好定性分析具有分离速度快，效率高，操作简单的优点，也被广泛应用。但是该方法需要大量试剂的引用。 1.6.3电化学法 电化学分析法主要包括库仑分析法，极谱分析法和高效毛细管电泳法。这些方法需要大量化学知识作为背景，操作复杂，所需要仪器也更多。 1.7 课题研究的目的意义内容和技术路线 1.7.1 研究的目的意义 芦苇适应性广，抗逆性强，多生长在江，河，湖，海岸淤滩等地，是湿地环境中生长的主要植物之一。此次实验我们选取的是来自崇明东滩盐沼湿地土著植物芦苇叶。根据前人研究成果，芦苇叶子中含有较为丰富的生理活性物质，但是我们发现对于芦苇活性物质的分离提取及其功能研究很少[12]。 本论文以芦苇中的可溶性总酚为主要的研究对象，对芦苇叶酚的提取方法进行探索，找到从芦苇中最佳提取酚的对应温度，浓度以及物料比的一个初步结论。 植物总酚是一类具有抗氧化和清除自由基功能的活性物质，由于其在治疗心脑血管疾病、预防癌症以及抗衰老等方面具有显著功效，被广泛地应用于医疗和保健行业，具有极大的开发和利用前景。 1.7.2研究的内容 1：对芦苇的处理方式：自然风干，剪碎，研磨。 2：采用有机溶剂提取法对其进行提取。 3：对最后的提取物采用分光光度计对其进行波长测量。 4：做出对照试验，通过没食子酸的波长测量，并制作出方程回归线，从而确定芦苇叶中酚的最佳提取量。没食子酸标准曲线的绘制：准确称取一水合没食子酸0.110 ± 0.001g，用水完全溶解后，转移到50ml 容量瓶中定容，配制成浓度为1000mg/L 的没食子酸标准溶液；用移液管吸取0.1,0.2,0.3,0.4,0.5,0.6,0.7和0.8ml 标准溶液到50ml 容量瓶中，定容。分别吸取上述标准溶液1.0ml，加蒸馏水5ml、FC 显色剂1ml，7.5% 碳酸钠溶液3ml，混匀，25℃水浴1.5h后，在760nm 波长下测定系列标准溶液的吸光度，绘制标准曲线，求回归方程。 (责任编辑：qin) |