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PCR扩增：10μL的反应体系（如表1），即提取好2μL DNA，2μL SSR引物，再加6μLMix（Mix：ddH2O=5:1）后放入PCR仪扩增（PCR扩增程序（如表2）：94℃预变性 5min; 94℃35s,55℃30s,72℃40s(38个循环); 72℃延伸10min）产物放置4℃保存。

试剂                   体积

DNA                   2μL

SSR引物               2μL

 5μLMix                 5μL

ddH2O                  1μL

表1    10μL的扩增反应体系

  步骤           温度        时间           

Step1           94℃        5min

Step2           94℃        35s

Step3           55℃        30s

Step4           72℃        40s(38个循环)

Step5           72℃        延伸10min

表2  PCR扩增程序 

1、2、2 扩增产物电泳及检测

扩增产物在 2% 的聚丙烯酰胺凝胶上进行分离，（称取8g琼脂糖，再加入400mL电泳液(TBE:H2O1:10)中），电压 130 V/cm，经染色（核酸染料）、显影后，拍摄SSR 谱带照片备存和数据分析。

1、3 SSR引物的筛选文献综述

采用SSR标记技术，根据所选的欧洲大麦的样品进行对引物的筛选，获得具有高度多态性的引物。

1、4 数据统计和统计方法

使用Excel软件记录51份大麦品系的SSR谱带照片中的DNA条带大小值。利用28对的引物构建大麦指纹图谱，记录扩增条带，用“1”和“0”分别来表示同一位置扩增片段的有或无。

参考薛华柏等[7]的方法来构建SSR 特征指纹数据表。利用筛选到的SSR引物对欧洲地区大麦品种进行指纹图谱的构建[8-10]。

1、5 数据分析

根据指纹图谱来分析大麦的遗传机制[11-12]。

2、结果与分析

2、1 SSR多态性分析

通过筛选，从多对引物中筛选到28对多态性好的引物（如表3所示），可在实验中得到多个多态性片段