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摘    要目的：应用WCX纳米磁珠结合SELDI-TOF-MS技术检测绘制不同控制水平的儿童哮喘血清蛋白指纹图谱，筛选并分析组间的差异。方法：建立完全控制组和未控制组哮喘儿童血清蛋白指纹图谱，采用Biomarker Wizard 3。1软件比较分析完全控制组和未控制组哮喘儿童血清蛋白图谱的差异。结果：筛选到差异蛋白峰共10个（P<0。05），其中有1个蛋白峰在控制组表达减少，9个蛋白峰在控制组表达增加。结论：采用WCX纳米磁珠结合SELDI-TOF-MS技术能有效检测不同控制水平的哮喘儿童血清中的蛋白；控制组和未控制组的哮喘儿童血清中存在的差异蛋白峰，可为进一步研究儿童哮喘不同病情控制水平的特点，对客观评价儿童哮喘临床治疗过程评价奠定初步的实验基础。89642

Objective: SELDI-TOF-MS combined with Weak cation exchange (WCX) magnetic beads was used to screen serum samples from of children asthma at different control levels。 Method: The serum protein fingerprints of the controlled group and the uncontrolled group were established。 The differentially expressed protein peaks were analyzed by Biomarker Wizard 3。1。 Results: Ten protein peaks were found to discriminate the controlled and the uncontrolled group (P<0。05)。 There was one of the protein peaks was decreased in the control group。 The other 9 different protein peaks were increased in the control group。 Conclusion: SELDI-TOF-MS combined with WCX magnetic beads can detect the differentially expressed protein peaks in differernt control levels of children asthma。 Differential protein was identified as a potential biomarker for children asthma and showed diagnostic values in clinical application。 This provided a new foundation for clarifying children asthma pathogenesis。

毕业论文关键词：表面加强激光解析电离飞行时间质谱； 哮喘； 差异蛋白峰； 蛋白组学

Keyword: SELDI-TOF-MS； asthma； Differential protein peak；Proteomics

目    录

1引言 4

2 材料与方法 5

2。1 实验材料 5

2。1。1病例诊断分组 5

2。1。2样本收集 5

2。1。3试剂和耗材 5

2。1。3。1试剂 5

2。1。3。2耗材 5

2。1。4缓冲液及溶液配制 5

2。1。4。1 U9溶液（9 M尿素，2 % CHAPS，1 % DTT）  5

2。1。4。2 WCX-2缓冲液 (50 mM NaAC，PH 4。0) 5

2。1。4。3 1% TFA溶液 5

2。1。4。4 SPA饱和溶液 6

2。1。4。5 CHCA基质溶液 6

2。1。5 主要仪器 6

2。2方法 6

2。2。1血清样品处理 6

2。2。2WCX磁珠处理源Q于W优E尔A论S文R网wwW.yOueRw.com 原文+QQ75201,8766 血清 6

2。2。2。1WCX纳米磁珠活化 6

2。2。1。2活化WCX纳米磁珠捕获血清蛋白 6

2。2。3。CM10蛋白芯片处理血清蛋白 6

2。2。4 SELDI-TOF-MS检测 7

2。2。4。1仪器校正 7

2。2。4。2仪器检测参数 (责任编辑：qin)