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2。2。2 低氧暴露期间蔗糖摄入处理

2。2。2。1 动物分组

将32只200g左右的雄性SD大鼠随机分成4组，每组8只，分别命名为常氧（未低氧暴露）组（C）、低氧暴露组（H）、常氧并提供蔗糖组（SC）、低氧暴露并提供蔗糖组（SH）。

2。2。2。2 称量体重和摄食量

每天称量每组大鼠的体重、摄食量，方法同2。2。1。2。

2。2。2。3 模拟低氧应激

采用人工低压低氧实验舱进行低氧暴露处理（低氧暴露24h；氧分压11。3kPa，氧浓度10。8%）。第15天将H组、SH组大鼠一起放入低氧舱24h；C组和SC组大鼠为实验室氧环境。

2。2。2。4 称量糖水摄入量文献综述

第15天在低氧暴露期间，对SC组和SH组同时提供不限量的30%蔗糖溶液，记录下初始蔗糖溶液重量，于第16天低氧暴露结束后称量并计算SH组和SC组大鼠在低氧暴露期间的糖水摄入量。

2。2。2。5 取材

同2。2。1。5。

2。2。3 血清皮质酮检测

方法如下：

1。标准曲线的制作

1）用0。04mol/L NaOH将皮质酮标准品稀释成浓度分别为：60，40，30，20，15，10μg/ml。

2）吸取0。4mL各浓度标准品加入到5ml二氯甲烷中，反复震荡2min后静置，用胶头滴管吸取上层水相弃去，保留下层。

3）用移液管吸取下层有机相3ml，加入3ml硫酸乙醇显色剂（浓硫酸7：无水乙醇3），震荡2min，充分混匀。

4）静置30min后，呈现蓝紫色分界线，以此为界，用胶头滴管吸取上层液弃去，下层溶液静置30min。

5）测定。用荧光分光光度计测定其荧光强度（λex/λem=470nm/520nm）。

2。样品测定

1）血清样品冻融，取0。4ml加入到5ml二氯甲烷中。