drt1突变体的光反应分析(3)
时间:2023-10-01 17:21 来源:毕业论文 作者:毕业论文 点击:次
2×Taq Mix 10 Forward primer (10uM) 1 Reverse primer (10uM) 1 DNA 2 ddH2O 6 Total 20 PCR扩增反应的程序为: 94°C 3min 94°C 30sec 58°C 30sec 72°C 1min 72°C 5min 16°C Hold Forever 3。3 电泳 配胶:先称量5g琼脂糖再用量筒取100ml缓冲液,先后移入专用锥形瓶,微波炉中加热2。5分钟两次,加入染液。均需摇匀,拿放需带防护手套小心烫伤。 安装:在使用凝胶床之前我们先要把凝胶床洗干净,晾干,放在工作台上,切记工作台需要水平,在这之后插上样品梳。 灌胶:将琼脂糖溶液轻轻倒入凝胶床上确保在倒入凝胶时溶液中没有气泡,等待20分钟琼脂糖胶会完全凝固,再拔出梳子,在这之后向电泳槽内加入电泳缓冲液。 加样:用20μL移液器将PCR产物加到样品槽中,且加Mark做标准,切记每一行之前都要添加Mark,再向每槽加10-20μL产物,记录样品的点样次序和加样量。 电泳:安装好电泳仪之后,把其电压调整至220V,接下来进行电泳,电泳15-20分钟,10分钟之后每2分钟前去观察一次,当溴酚蓝移到距凝胶前沿1-2cm时,就可以停止电泳来进行扫胶了。 染色和观察:取出凝胶稍微冷却一会儿防止凝胶过热而导致机器自动关机,当凝胶温度不在烫手后放入机器照射,电脑中图像分析并标记点样序号和样品名及引物,操作时必须戴手套。 (责任编辑:qin) |