麦秸还田和水分管理对稻田土壤微生物特征的影响(2)
时间:2018-07-17 20:38 来源:毕业论文 作者:毕业论文 点击:次
1 材料与方法 1.1试验地点 试验在南京农业大学试验农场进行，前茬为小麦，土壤质为粘土，耕作层有机质质量分数18.36g/kg、全氮1.02g/kg、速效氮94.8 mg/kg、速效磷22.5mg/kg、速效钾91.7 mg/kg。 1.2 试验设计与田间管理 试验采用三因素裂区试验设置，三次重复，主区为水稻品种，副区为水分管理模式，再副区为麦秸还田量。设置两个麦秸还田水平：无麦秸还田（S0）和麦秸还田量为6000kg/hm2（S6000），秸秆还田方式为经联合收割机粉碎后机械化旋耕还田。设置两个水分管理模式：（1）常规淹水灌溉(CI)，3-4cm左右水层插秧，水稻移栽后至无效分蘖期田面一直保持1-3cm 的浅水层，根据降雨量大小进行适量灌排，无效分蘖期实行搁田。自孕穗开始到成熟期之前一周保持浅水层。（2）干湿交替灌溉(DWA)，1-2cm浅水插秧，移栽后7d田间保持 1-3cm水层确保秧苗返青活棵，7d后进行干湿交替灌溉，用土壤水势仪监测土壤水势，根据降雨量大小进行适量灌排，当田间由浅水层自然落干至水势为-15KPa时，灌水至田面有1-3cm浅水层，再自然落干到土壤水势为-15KPa，再上浅层水。无效分蘖期实行搁田，孕穗期保持浅水层，抽穗期之后继续干湿交替，收获前1周断水，自然落干。 水稻季试验品种为淮稻5号，6月15日机插秧栽种，秧龄20d，叶龄3.3-3.5叶，株行距为13.3cm×30cm，采用30cm插秧机移栽，调节取秧量，并在机插移栽后进行人工定苗。水稻施肥为基肥氮素45kg/hm2，分蘖肥氮素135kg/hm2，穗肥氮素120kg/hm2，分蘖肥于移栽后7天和14天等量施入。磷肥P205用量10kg，全做基肥；钾肥K2O用量10kg，做基肥和促花肥等量施入。小区间薄膜包埂，单独排灌。 1.3土壤微生物有机质含量的测定 参照姚槐应的方法测定水稻成熟期土壤的微生物（包括细菌、真菌、放线菌）的数量和生物量态氮，取土样时将水稻植株连根一起挖出，收集土样。微生物采用稀释平板法计数，细菌采用牛肉蛋白胨培养基；放线菌采用高氏1号培养基；真菌采用马丁氏培养基。土壤中的生物量态氮采用改进的氯仿熏蒸法测定。 1.3.1牛肉蛋白胨培养基 牛肉膏3g、蛋白胨10g、NaCl 5g、琼脂 15—20g、水 1000ml、pH 7.4—7.6（7.0—8.0）按照培养基的配方，准确称量牛肉膏、蛋白胨、NaCl，并依次放入烧杯中。牛肉膏余姚用玻棒挑取，然后放在表面皿中称量，接着用热水溶化后倒入烧杯。加入的纯水要先少于需用量，用玻棒搅拌均匀，然后，在石棉网上加热至牛肉膏完全溶解。用精密PH试纸测量培养基的原始PH值，如果PH偏酸，用滴管向培养基中逐滴加入1mol/L NaOH，边加边搅拌，并随时用PH试纸测其PH值，直至PH达7.6。反之，则用1mol/L HCl进行调节。使最后PH为7.4-7.6。 1.3.2高氏1号培养基 可溶性淀粉（20g），KNO3（1g），K2HPO4（0.5g），MgSO4• 7H2O（0.5g），NaCl（0.5g），FeSO4• 7H2O（0.01g），琼脂 20g，pH=7.4-7.6。根据配方用量先称取可溶性淀粉20g，放入小烧杯中，加入少量冷水搅拌至淀粉成糊状，将之前所得糊状物加入少量沸水（略少于所需要求）中，继续加热，至糊状物完全溶化。然后再称取其他各成分，并依次加入溶化。 接着配置固体培养基，根据配方称量琼脂并加入之前所得试剂中，并加热融化，用容量瓶定容，补足损失的水分。用试纸测培养基的原始PH,如果偏酸，用滴管向培养基中加入1mol/L NaOH,边滴边搅拌，并随时用pH试纸测其PH,直至PH达7.6。反之，用1mol/LHCI进行调节。 1.3.3马丁氏培养基 K2HPO41g、MgSO4*7H2O 0.5g，蛋白胨5g，琼脂15~20g，水1000ml，自然pH。按配方先称取各成分，用少于所需量的纯水溶解。待完全溶解后，容量瓶定容并补充水分到所需量。再将孟加拉红配成1%的水溶液，在1000ml培养液中加入以上孟加拉红溶液3.3ml，混匀后，加入琼脂加热融化。调PH检测培养基的PH，若偏酸，可滴加1mol/l NaOH，边加边搅拌，并随时用PH试纸检测，直至达到所需PH范围。若偏碱，则用1mol/l HCl进行调节。在使用前先将培养基融化并降温到45℃再加入链霉素，保证链霉素不受热分解。先将链霉素配成1%的溶液，在每100ml的培养基中加入配置的链霉素溶液0.3ml，制成每毫升含链霉素30ug的培养基。 (责任编辑：qin) |