华鳈sox9基因克隆与多态性分析(2)
时间:2023-10-19 22:37 来源:毕业论文 作者:毕业论文 点击:次
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4 讨论 11 结论 13 参考文献 14 致谢 15 1 前言 1。1 Sox9 基因研究背景 Sox 基因家族是在 HMG 保守盒内与哺乳动物性别决定基因 SRY 的相似性大于 60 %的 一系列基因[1]。Sox9 基因是紧靠 SRY 基因的下游基因,它的研究对于性别决定机制的研究 有着十分重要的意义[2]。Sox9 基因参与多种生理活动的调控,其中最主要的功能还是性别 决定[3]。该基因也是鱼类起源和进化研究中的常用基因。目前多种鱼类中已有 Sox9 基因的 研究报道[4],如罗非鱼(Oreochromis aurea)、黄鳝(Monopterus albus)、西伯利亚鲟(Acipenser baeri Brandt)[5-7]等,但关于华鳈 Sox9 基因的研究开展不多。另外,该基因也是鱼类起源 和进化研究中的常用基因。 1。2 华鳈概述 华鳈(Sarcocheilichthys sinensis)属鲤形目,鲤科,鰁属。在我国平原地区的江河、 湖泊均有分布[8]。鳈属鱼类在我国记载的有 8 种,而只有 1951 年前苏联学者对黑龙江流域 的东北鳈(S。 lacustris Dybowski)的早期发育做过简单概述[9]。华鳈个体较小,数量少, 生长缓慢,其肉可食,也可入药,具有安胃和中、利小便、来自优I尔Y论S文C网WWw.YoueRw.com 加QQ7520~18766 解热毒之功效,主治水肿胀满、 黄疸、疮毒等症[10]。同时因其体色鲜艳,个体小,易于饲养等特点,作为观赏鱼已越来越 受人们的喜爱[11],有一定的经济价值[12]。目前对于华鳈的研究只要集中在人工驯养和繁殖 阶段。 1。3 研究目的与意义 人与动物的性别决定机制的研究一直是生命科学中研究的重要领域,而鱼类作为最低 等的脊椎动物类群,也作为水生到陆生进化环节中的重要环节,其性别决定具有原始性, 可塑性和多样性等特点。由于 Sox9 基因对于研究性别机制有着十分重要的意义,因此研 究华鳈的 Sox9 基因对于华鳈的养殖有着一定的意义,不仅可以完善华鳈研究的领域,也 具有一定的经济价值。本研究拟采用 RT-PCR 和 RACE 法克隆获取华鳈 Sox9 基因序列并 进行进化分析,以期为后续研究中在该基因中的搜寻多态性位点并进行关联分析,以及性 别决定机制与生长等研究提供参考。 2 材料与方法 2。1。1 实验所用仪器 Mini-7k 微型离心机 杭州奥盛仪器有限公司 Gel DocTM EZ Imager 凝胶成像系统 VORTEX-5 震荡器 海门市其林贝尔仪器制造有限公司 DYY-6C 型 电泳仪电源 北京市六一仪器厂 UVG20 紫外分析仪 上海领成生物科技有限公司 Eppendorf 单道微量可调移液枪 ND-2000C 微量紫外分光光度计 Gene Company Limi 基因有限公司论文网 DK-S24 电热恒温水浴锅 上海精宏实验设备有限公司 太仓精宏仪器设备有限公司 HPS-160 生化培养箱 SN210C 灭菌锅 DH6-914385-Ⅲ 电热恒温鼓风干燥箱 上海新苗医疗器械制造有限公司 BSA124S 电子天平 塞多利科学仪器(北京)有限公司 IMS-100 全自动雪花制冰机 常熟市雪科电器有限公司 TGL-16GB 高速台式离心机 上海安亭科学科学仪器 2。1。2 实验所用药剂 LB AMP+ 有氨苄青霉素 LB 液体培养基 LB AMP- 有氨苄青霉素 LB 液体培养基 Gel Extraction Kit 快速琼脂糖凝胶 DNA 回收试剂盒 康为世纪生物科技有限公司 (责任编辑:qin) |