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3。4。1。2 LB培养基中细菌RNA的提取

将APEC E1株在LB培养基中静置过夜培养后按上述RNAiso plus试剂盒法提RNA。

3。5 RNA质量检查

提取出的RNA每管分别取1μL ，用核酸微量检测仪测OD 260和 OD 280，RNA样品的OD 260/280应在1。7-2。1之间。

3。6 RNA电泳检查文献综述

琼脂糖凝胶的制备：天平称取琼脂糖0。3g，放入150mL三角烧瓶中，加入30ml 1×TAE溶液，轻轻摇匀，然后置于微波炉中加热融化，加热1－2min至沸腾，从微波炉中取出，摇匀，直至肉眼观察无凝絮状悬浮物。冷却至约60℃，加入0。5ml Goidview染料，摇匀，倒入制胶器中，插入梳子。室温放置约30min后即可使用。待琼脂糖凝胶凝固后将梳子拔出，顺着胶板轻轻将凝胶推入电泳槽中保存。

从提取的RNA中取0。5μg 样品加入0。2mL的指型管中，用超纯水补至8L，加入2μL 5 × loading buffer混匀。在70℃水浴锅中加热10min使其变性，然后置于冰上1min，加入 1μL EB溶液，离心后在凝胶上样，进行电泳。电泳条件为：电压120V，电流80mA，时间35min。电泳结束后，将凝胶置于凝胶成像仪照像。RNA质量判定标准(原核生物)：有清晰的23S、16S条带，无降解，且肉眼观察23S条带亮度约是16S的1-2倍。