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3。2。4  NaCl对菌株生长的影响

将菌株ZD-5的培养液接种到NaCl的百分比浓度分别为0%、1%、2%、3%、4%、5%、6%、7%的种子培养基中培养。培养温度为37℃，接种量为10%。根据前述方法测定生长曲线，计算比生长率。

3。2。5  培养基的初始pH对菌株生长的影响

将菌株ZD-5的培养液接种到种子培养基中，培养基的pH分别设定为4、5、6、7、8、9、10、11，培养温度37℃，接种量为10%。根据前述方法测定生长曲线，计算比生长率。

3。3  碱性蛋白酶生产菌ZD-5发酵周期的初步确定文献综述

将ZD-5菌株接种于基础发酵培养基中（接种量为2%），然后在37℃，转速为200r/min的条件下培养，分别取发酵12h，24h，36h 和 48h的发酵液，测定发酵液的酶活力，每个时间段作3个重复。根据酶活力的大小判断发酵周期。

3。4  碱性蛋白酶生产菌ZD-5产酶条件的优化

在37℃，转速为200 r/min 的条件下，分别优化碳源、氮源、起始 pH 值、接种量等参数。

3。4。1  最适碳源的确定

将基础发酵培养基中分别加入2%可溶性淀粉、葡萄糖、蔗糖、乳糖、麦芽糖、玉米粉和麸皮，其他成分和含量不变，进行发酵培养，测定发酵液碱性蛋白酶活力，以酶活力高低作为指标。 

3。4。2  最适氮源的确定

以2%玉米粉为碳源，将基础发酵培养基中的蛋白胨分别替换为 0。5%牛肉膏蛋白胨、花生饼粉、牛肉膏、酵母膏、尿素、硝酸铵和大豆蛋白胨，其他成分和含量不变，进行发酵培养，测定发酵液碱性蛋白酶活力，以酶活力高低作为指标。