水稻FWL基因家族镉胁迫下的表达分析(3)
时间:2024-04-04 11:04 来源:毕业论文 作者:毕业论文 点击:次
Concentration Volume(µl)
SybrGreen qPCR Master Mix 2X 10 引物F (10uM) 10µM 0。4 引物R (10uM) 10µM 0。4 ddH20 7。2 Template (cDNA) 2 Total 20µl (2)PCR循环条件 Thermal Cycler Times and Temperatures 熔解曲线步骤 Initial Steps Each of 45 cycles Melt Anneal Extend LightCycler480 Software Setup(Roche 罗氏) HOLD CYCLE 3 min 95℃ 7 sec 95℃ 10s 57℃ 15s 72℃ 2。5数据分析文献综述 不同处理间的显著性差异运用t测验来检测,利用SigmaPlot 10。0绘图。 3 研究结果 3。1总RNA的提取与反转录 利用Trizol提取试剂盒提取24个样品总RNA,用DNase I处理去除样品中的基因组DNA污染,RNA质量经琼脂糖凝胶电泳检测后结果见图1。利用紫外分光光度计检测样品OD值(表1)。结果表明,样品浓度在176。54-703。26 ng/ul之间,OD260/OD280比值在1。92-2。05的范围内,说明获得的总RNA纯度较好。800ng总RNA参照第一链cDNA合成试剂盒的方法进行反转录。 (责任编辑:qin) |