马铃薯Hsfa4c基因表达模式分析与表达载体构建
时间:2018-08-02 15:59 来源:毕业论文 作者:毕业论文 点击:次
植物在生长和发育过程中会受到各种非生物因子的胁迫,其中温度对植物生长发育的影响尤其严重。近年来,随着全球温室效应的加剧、气温的上升,植物正面临着高温的胁迫。马铃薯(Solanum tuberosum),茄科茄属,一年生草本植物。马铃薯喜欢低温环境。挖掘马铃薯耐热基因,了解其耐热机制,培育耐热品种是应对高温胁迫的有效途径。植物遭遇热害时,热激转录因子(Hsfs)起到重要的作用,热激转录因子通过与热激基因启动子上热激元件的特异性结合来调节热激蛋白(Hsp)的产生。以往研究表明,Hsfa4c响应于氧化还原胁迫,具有调节基因表达的功能。本实验室对栽培种马铃薯(Solanum tuberosum)热激转录因子进行了系统的研究,鉴定得到27种热激转录因子,其中StHsfa4c在非胁迫条件下属组成型表达,在热激处理开始的短时间内表达量迅速上升。本文对栽培种马铃薯(Solanum tuberosum)和野生马铃薯(Solanum pinnatisectum)热激转录因子Hsfa4c基因进行了组织表达和诱导表达的分析,初步阐明了基因的时空表达模式,并构建了野生马铃薯SpHsfa4c基因过表达载体和反义表达载体,以期为后期基因功能的研究提供材料支持。26603 毕业论文关键词:马铃薯;热激转录因子;表达模式分析;载体构建 Analysis on the expression of Hsfa4c gene in potato and construction of expression vectors Abstract: In the course of growth, plants are subjected to various non-biological factors, especially for temperature. In recent years, as the global greenhouse effect has intensified and temperatures have risen, the plants are facing high temperature stress. S. tuberosum, Solanaceae, is one kind of annual herb. The potato is always adapted to cold environment. When plant facing the heat stress, heat shock transcription factors (Hsfs) play an important role. Our laboratory has systematically studied heat shock transcription factors and identified 27 kinds of heat shock transcription factor genes in S. tuberosum, of which StHsfa4c was upregulated in non stress conditions and had a rapid rise in the amount of expression in a short time at the beginning of heat shock. In this study the expression of heat shock transcription factor Hsfa4c gene was analyzed in S. tuberosum and S. pinnatisectum, illustrating gene expression patterns. And wild potato SpHsfa4c gene overexpression vector and antisense expression vector were constructed, which will provide material support for the study of its gene function. Key words: potato;heat shock transcription factors;expression pattern;expression vectors 目录 摘要 1 引 言 2 1 材料与方法 3 1. 1 试验材料 3 1.2 实验方法 3 1.2.1 Hsfa4c基因表达模式分析 3 1.2.2表达载体构建 4 2 结果与分析 5 2.1 SpHsfa4c的组织表达特性 5 2.2 StHsfa4c的组织表达特性 5 2.3 Hsfa4c基因的热激诱导表达模式分析 5 2.4 SpHsfa4c基因的获得 6 2.5 pCMBIA1306-SpHsfa4c正反义表达载体的构建 7 3讨论 7 致谢 8 参考文献: 8 附录 9 引物序列 9 马铃薯Hsfa4c基因表达模式分析与表达载体构建 引 言 1植物热害 在植物的生长发育过程中,植物体所受到的不利于自身的种种环境因素统称为逆境胁迫[1]。温度其中重要的一种,温度影响植物体组织结构和酶系统的活力,对植物种子萌发、开枝散叶、开花结果等一系列生命活动有着极其重要的影响。当外界环境中的温度超过植物的适宜温度时,植物会产生一系列生理和形态上的变化,严重时甚至导致死亡。 (责任编辑:qin) |