软骨中硫酸软骨素的提纯与应用(3)
时间:2018-10-11 21:08 来源:毕业论文 作者:毕业论文 点击:次
1.2 硫酸软骨素的作用 硫酸软骨素有预防动脉粥样硬化的作用。由于硫酸软骨素能够和血浆脂蛋白结合，形成复合物，降低血管壁的通透性，阻止或者限制大分子脂蛋白的渗入[12]。并且，硫酸软骨素也具有降低血脂的功能，作用原理是他能增强毛细血管内皮某些脂酶的活性并促进酯酶的释放，从而使甘油三酯降解成脂肪[13]。因为硫酸软骨素的阴离子能有炎性递质结合，所以它对主动脉，冠状动脉，心肌等结缔组织还具有抗炎的作用[14]。 并且硫酸软骨素还有治疗风湿病和关节炎，保存角膜等其他医学用途。 同时，硫酸软骨素在食品和化妆品层面也有很多用处。可以与苯丙氨酸配制成药膳，用于止痛。用于化妆品可以抗氧化，有助于皮肤的锁水保湿功能，以及保持皮肤的光洁度。 1.3 硫酸软骨素的提取工艺和方法 1.3.1 软骨硫酸软骨素的多糖的碱法提取工艺 碱法提取硫酸软骨素的作用原理是由于硫酸软骨素与蛋白质连接的O-糖苷键可以在碱的作用下发生β-消去反应,使糖-肽键断裂,硫酸软骨素从蛋白多糖中释放出来,但在强碱作用下硫酸软骨素容易发生降解。碱法的提取工艺通常与酶解相结合,近年来的研究多利用两者相结合来提取,可以制备出高质量的硫酸软骨素。 1.3.2 软骨硫酸软骨素的酶法提取工艺 酶法提取工艺是用蛋白酶水解蛋白质的特异性,使胶原蛋白和粘蛋白等物质水解成氨基酸,再根据氨基酸和硫酸软骨素在某些溶剂中的溶解性不同,实现硫酸软骨素与其它杂质的提取分离。酶法作用条件温和,不会使硫酸软骨素产生降解反应。本实验用的酶制剂是木瓜蛋白酶。 1.3.3 软骨硫酸软骨素的测定方法、多糖组分分析 采用咔唑分光光度法测定硫酸软骨素。硫酸软骨素在酸性溶液中水解生成D-葡萄糖醛酸和N-乙酰-D-氨基半乳糖。本方法是根据硫酸软骨素溶液加热水解生成等摩尔数的葡糖糖醛酸，与咔唑溶液发生缩合反产生成紫红色化合物。 硫酸软骨素中的葡萄糖醛酸在四硼酸钠硫酸溶液的作用下加热形成糠醛，在0.2%咔唑无水乙醇溶液中加热呈现红色，在530nm波长处有最大吸收。 测得的数据与标准曲线比较，得出硫酸软骨素含量。 1.3.4 硫酸软骨素粗品的纯化 本实验用Amberlite IRA-933 型阴离子交换树脂对硫酸软骨素的粗品进行纯化。 阴离子交换树脂含有碱性基团，如季胺基(也称作四级胺基)－NR3OH(R是碳氢基团)，能在水中离解出羟基而成为强碱性，如伯胺基(也称作一级胺基)-NH2、仲胺基(二级胺基)-NHR、或叔胺基(三级胺基)-NR2，他们在水中可以离解出羟基而呈现碱性。这种交换树脂的正电基团可以与溶液中的阴离子吸附结合，然后产生阴离子交换作用。从而达到分离纯化酸性目标物的目的。 1.3.5硫酸软骨素的应用 将制得的硫酸软骨素加入乳膏剂的配方中，得硫酸软骨素乳膏剂成品。并检测有效成分的含量及出水率。 1.4 课题研究的目的和意义 在我国，硫酸软骨素临床应用在医治神经痛，肩关节疾病等，对链霉素引发的听觉苦难和噪音引发的听觉障碍，耳鸣症等的医治和预防都有明显的成效。 在欧美和日本等发达的国家，硫酸软骨素更多的是用作保健食品，应用于冠心病，心绞痛，心肌梗塞等多种疾病的防治，能显著降低其发病率和死亡率，并且无明显的毒副作用。 在如今的国内，国际市场，硫酸软骨素大量为为改良关节病的补充品，已然成为重要的生化产品。由于全世界的共有3.55亿关节炎患者，仅我国就占1亿[15]，市场需求快速上升，仅在美国，年销量已达600吨，消费市场巨大。而在我国，硫酸软骨素的制造企业规模小，生产设备落后，科研力量不足，为了改善这一现象，提高产能和质量，扩大国内用量，并提高输出量，适应国内外对原料和制剂的要求，我们必须研究改进硫酸软骨素的制备生产工艺和纯化方法，增强我国企业的竞争力，因此，本课题的研究具有重要意义。 (责任编辑：qin) |