小麦赤霉病菌β2-微管蛋白E198A突变型对多菌灵的抗药性调控研究(3)
时间:2018-11-20 20:15 来源:毕业论文 作者:毕业论文 点击:次
（2）加入到2ml的灭菌离心管中，并加入800μl 2% CTAB，摇匀，65℃恒温水浴1 h，期间混匀2-3次； （3）加入等体积的苯酚-氯仿-异戊醇（体积比为25:24:1），颠倒混匀后，12000 rmin-1离心10 min； （4）取上清液于新离心管中，加入等体积的氯仿，12000 rmin-1离心10 min； （5）重复步骤4； （6）取上清液于1.5 ml的灭菌离心管中，加入2.5倍体积的无水乙醇，-20℃沉淀1 h，12000 rmin-1离心10 min； （7）弃上清液，加入400μl 75%乙醇，12000 rmin-1离心10 min； （8）重复步骤7； （9）弃上清液，自然晾干后加30-35μl灭菌水溶解沉淀，离心备用。 1.2.2 原生质体的制备与转化 （1）在100ml的YEPD培养基中培养菌丝，25℃，175r/min，摇培12-14h； （2）用灭过菌的三层擦镜纸过滤菌丝体，0.7mol/L NaCl冲洗； (责任编辑：qin) |