复合菌肥缓解污灌对玉米土壤酶的影响(4)
时间:2017-02-14 13:13 来源:毕业论文 作者:毕业论文 点击:次
无土对照：不加土样，其他操作与样品实验相同。 无基质对照：以等体积的水代替基质，其他操作与样品实验相同。 1.4.1.3 结果计算 蔗糖酶活性以24h后，1g干土生成葡萄糖毫克数表示。 蔗糖酶活性=（a样品－a无土－a无基质）×V×n/m a样品、a无土、a无基质分别表示其由标准曲线求的葡萄糖毫克数；V为显色液体积；n为分取倍数，浸出液体积/吸取滤液体积；m表示烘干土重。 1.4.2 土壤淀粉酶活性的测定 1.4.2.1 试剂 （1）1%淀粉 （2）甲苯 （3）pH5.6磷酸盐缓冲溶液 （4）3,5-二硝基水杨酸溶液 （5）麦芽糖标准溶液 1.4.2.2 操作步骤 称5g风干土，置于50mL的三角瓶中，注入10mL1%淀粉溶液，再10mLpH5.6磷酸盐缓冲溶液和5滴甲苯。摇匀混合物后，放入恒温箱，在37℃下培养24h。培养结束后，将悬液迅速过滤。从中吸取滤液1mL，注入50mL容量瓶中，加2mL3,5-二硝基水杨酸溶液，并在沸腾的水浴锅中加热5min，随即将容量瓶移至自来水流下冷却，定容后在分光光度计上于波长508nm处进行比色测定。 1.4.2.3 结果计算 淀粉酶活性以24h后，1g干土生成麦芽糖毫克数表示。 淀粉酶活性=（a样品－a无土－a无基质）×V×n/m a样品、a无土、a无基质分别表示其由标准曲线求的麦芽糖毫克数；V为显色液体积；n为分取倍数，浸出液体积/吸取滤液体积；m表示烘干土重。 1.4.3 土壤脲酶活性的测定 1.4.3.1 试剂 （1）甲苯 （2）10%尿素 （3）柠檬酸盐缓冲液（pH6.7） （4）苯酚钠溶液（1.35mol/L） （5）次氯酸钠溶液（活性氯的浓度为0.9%） （6）氮的标准溶液 1.4.3.2 操作步骤 （1）称取5g风干土样于100mL容量瓶中。 （2）向容量瓶中加入1mL甲苯（以能全部使土样湿润为度）并放置15分钟。 （3）之后加入10mL10%尿素溶液和20mL柠檬酸盐缓冲液（pH6.7），并仔细混合。 （4）将容量瓶放入37℃恒温箱中，培养24h。 （5）培养结束后，用热至38℃水稀释至刻度，仔细摇荡，并将悬液用致密滤纸过滤于三角瓶中。 （6）显色：吸取3mL滤液于50mL容量瓶中，加入10mL蒸馏水，充分震荡，然后加入4mL苯酚钠，仔细混合，再加入3mL次氯酸钠，充分摇荡，放置20分钟，用水稀释至刻度，溶液呈现靛酚的蓝色。 （7）1h内在（靛酚的蓝色在1h内保持稳定）在分光光度计上用1cm液槽，于578nm处将显色液进行比色测定。 (责任编辑：qin) |