对小麦不同生长时期叶片气孔指数的观察(3)
时间:2016-11-12 12:55 来源:毕业论文 作者:毕业论文 点击:次
②从固定液中取出的材料，将双面胶平行粘在滤纸上，揭去胶上的纸，用吸水纸吸干水分后粘在在双面胶上展平， 贴上标签，放入培养皿中。 ③称取6g 琼脂糖，倒入400mL ddH20中，滴加十滴左右1% 孔雀石绿染液染色，放在电炉上加热，反复搅拌，煮沸两到三次，使琼脂糖完全溶解。 ④待琼脂糖冷却至60℃左右时倒入培养皿中，动作要快，并且尽量倒匀，淹没材料即可，静置待其冷却。 ⑤培养皿倒置取出琼脂糖凝胶，用镊子揭去滤纸那一层，同时将叶片也轻轻揭下，得到了含有拓痕的凝胶块，用刀片沿叶片轮廓切开凝胶，切成2㎝×1㎝的长方形小块，得到含拓痕的凝胶，用镊子夹取凝胶放在载玻片上制成临时装片。 ⑥在显微镜下观察并导入DP Cont roller 系统拍照。 1.3.3透明胶带粘取法 ①分别取培养15 天左右的周麦19，周麦22，周黑麦，河北黑麦的第二片叶从叶根部剪下，以及大田中未抽穗和抽穗的小麦的剑叶、倒二叶、倒三叶从根部剪下。 ②将叶片分别用清水冲洗三次，再用蒸馏水重洗一次，之后用吸水纸吸干水分，摆放整齐。 ③将塑料透明胶带拉开10～15㎝ ，胶面朝上放在实验台上。左手捏住叶片被剪那一端，将叶片正面粘在胶带上。先将叶片被剪去的那一端粘贴在胶带上，将叶片向叶正面弯曲并逐渐向前慢慢推进，直到叶尖也粘在胶带上，使叶片正面与胶带充分触。将胶带对折过来粘在叶片的背面用手指轻压使叶片与胶带之间紧紧黏住。然后用手指对捏胶带，使紧密黏住。 ④将胶带从一侧缓缓揭开，叶片的正面仍粘在胶带上，背面与胶带分离，但是叶片下表皮已经粘在胶带上。 ⑤将粘有叶片下表皮的胶带沿表皮轮廓剪成1㎝×1㎝的正方形胶带片。在载玻片上滴2 滴蒸馏水、1 滴1% 的碘- 碘化钾染液，将粘有叶片下表皮的胶带胶面向下放在载玻片上，用解剖针展平，染色1 min，盖上盖玻片。 ⑥调节数码显微镜，放大倍数40×10，并导入DP Cont roller 系统拍照。对气孔气孔形态特征进行观察，每个叶片各制3个临时装片在40×10数码显微镜下观察。每一装片上选取十个视野并进行拍照，即每个叶片共30幅图片。 2.结果与分析 2.1发芽率的统计 通过对小麦幼苗的培养，记录每培养皿中四种小麦种子的萌发数目，得到四种小麦种子的发芽率。从表1中可以看出小麦发芽率在开始几天较高，培养到第五天左右小麦发芽率已经基本上稳定，第优尔天以后发芽率保持不变。四个小麦品种中，周麦19发芽率最高，周麦22次之，河北黑麦和周黑麦一号的发芽率较低。 表1 四个小麦品种的发芽率统计表
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