FITC在氨基化合物定量分析中的应用研究
时间:2019-04-07 09:13 来源:毕业论文 作者:毕业论文 点击:次
| 摘要：本文阐述了通过研究FITC与多种含氨基化合物的相互作用，发现一些氨基化合物能够使FITC的荧光强度增强且改变反应条件多次测量其荧光强度的变化。 毕业论文关键词：FITC、氨基化合物、荧光强度 34325 FITC applied research in the quantitative analysis of amino compounds Abstract: This paper discusses the interaction through a variety of research and FITC-containing amino compounds,It found that some amino compound capable of FITC fluorescence intensity is enhanced and changing the reaction conditions repeatedly measure the change in the fluorescence intensity. Keywords: FITC; Amino compound; fluorescence intensity 前言 FITC的相对分子质量是389.4，它的最大吸收光波长在492 nm左右，最大发射光波长在525 nm到530 nm之间。FITC的强度易受溶液pH值的影响，溶液的碱性越强其强度也越强[1]。FITC见光易漂白所以应该保存在冷暗干燥处，例如冰箱且保存时间较长。FITC在目前的生活生产中应用及其广泛，其中就包括对氨基化合物的检测[2]。生物胺是我们所研究的氨基化合物中的重要的一类，它是一种含氮化合物，它在微生物和动植物的生长过程中都起着非常重要的作用。生物胺在我们的生活中也扮演着重要的角色，因为生物胺含量的多少决定着食品的质量。所以现代社会人们对生物胺的检测给予越来越多的注意与重视[3]。 对于生物胺的检测目前常用方法也有许多，比如离子色谱法、高效液相色谱法、薄层色谱法、气相色谱法、毛细管电泳法等等[4-7]。诸多检测方法在操作检测过程中都显得比较麻烦且对于生物胺的浓度有一定的限制，要求生物胺的浓度要达到一定的浓度才能进行检测。这对于那些生物胺含量较低的物质来说，很难通过上述方法检测出来[8]。通常使用的这些方法还有一些弊端，这些检测方法所需的实验试剂和药品大多会对环境造成污染而且对操作人员也会有影响。在现今如此重视和强调环保重要性的时代，这些应该都是不可取的，所以此时采用FITC来检测氨基化合物的方法就显得十分有意义。此方法不仅操作简洁，对仪器试剂药品要求也不高最重要的是大大降低了其实验过程中对操作人员的伤害以及对环境的污染问题。 用FITC来检测氨基化合物目前已被用于医学、农学和畜牧等方面。其应用也及其广泛，可以测定蛋白质、多肽、神经递质、细胞表面抗原、血药浓度、核酸、受体、细胞因子等各种生物活性物质。由此可见，加快进行对关于FITC在氨基化合物定量分析中的应用研究的相关实验就显得十分必要。 实验部分 1.实验药品 FITC、2-苯乙胺、3，4-二羟基苯甲酸、1,4丁二胺、酪胺、亚精胺、精胺、多巴胺、领苯二胺、对氯苯胺、色胺、尸胺(天津希恩思生化科技有限公司)、磷酸二氢钾(国药集团化学试剂有限公司)、二次水。 2.实验仪器 F-4500荧光分光光度计(日本HITACHI公司)，1-10 µL、10-100 µL、100-1000 µL、1000-5000 µL移液枪（大龙兴创实验仪器有限公司），pH计，微量荧光比色皿（江苏新力科技实力有限公司）。 3.实验方法 (1) 缓冲溶液的配制： 1.称取4.001 g左右的氢氧化钠并配置浓度为1 M左右的溶液100 mL。 2.用实验室浓盐酸制备1 M左右的Hcl溶液50 mL。 3.准确称取0.340 g磷酸二氢钾并配置浓度为0.01 M的溶液250 mL，用配置好的盐酸和氢氧化钠溶液调节pH至7.30。 (2) FITC溶液的制备：用移液枪移取3 µL的50 mM FITC贮备液，用二次水稀释100倍，浓度为500 µM。 (3) 氨基试剂的配制： 1.准确称量氨基化合物并配置浓度为0.1 M、500 µM、50 µM的氨试剂。 (责任编辑：qin) |