水稻响应纹枯病菌侵染差异蛋白的检测
时间:2019-08-04 14:32 来源:毕业论文 作者:毕业论文 点击:次
| 摘要：由立枯丝核菌引起的纹枯病是我国水稻最重要的病害之一，严重发生时可致水稻大量减产。水稻对纹枯病的抗性受多基因控制，由于抗病表型鉴定困难加上抗病数量或相关基因的效应普遍较小，导致有关水稻抗纹枯病基因的研究报道较少，严重影响水稻抗纹枯病分子机理的研究。水稻纹枯病菌侵染水稻后会引起水稻相应的抗病机制，使水稻体内的抗病基因出现一些变化(上调或者下调），从而参与对病原菌的抗病反应。本次试验选取了对纹枯病的中抗品种 TeQing 和高感品种Lemont，丝核菌侵染后 0 h、24 h分别取样进行蛋白质测序，通过生物信息学分析，挖掘响应纹枯病菌侵染的差异蛋白，利用实时荧光定量PCR 检测编码相关抗病蛋白的基因，比较在抗纹枯病水稻品种和感纹枯病水稻品种间的差异。 38003 毕业论文关键词：水稻；纹枯病；抗病蛋白；基因 Response of rice sheath blight fungus infection differences in protein detection Abstract： Caused by a nuclear bacteria made dry silk sheath blight is one of the most important diseases in rice, serious when can cause the rice production in large quantities. Of rice sheath blight resistance controlled by polygene, because the quantity of resistant phenotype identification difficulty with disease resistance or related gene effect is generally small, lead to the resistance to rice sheath blight gene research reports have been less opportunely, serious impact on the molecular mechanisms of rice sheath blight resistance research. Rice sheath blight fungus infection after rice will cause corresponding disease-resistant mechanism of rice, the rice resistance genes in the body appear some changes (raised or lowered), making it encoded protein increase or decrease. Selection of sheath blight of resistant variety TeQing and Lemont Gao Gan variety, silk nuclear mellea sampling respectively 0 h, 24 h after protein sequencing, bioinformatics analysis, excavated response protein sheath blight fungus infection, real-time fluorescent quantitative PCR detection code related disease-resistant protein genes, compared in the sense of resistance to sheath blight of rice varieties and sheath blight of rice varieties differences in these proteins, and further analysis of their function research. Key words: rice；Sheath blight；resistance protein；gene 目录 摘要1 关键词1 Abstract1 Keywords1 引言（或绪论）1 1材料与方法2 1.1试验材料2 1.1.1水稻材料的获取2 1.1.2菌株材料的获取2 1.1.3其他材料2 1.2试验方法2 1.2.1丝核菌侵染TeQing和Lemont两种水稻2 1.2.2蛋白组学测序2 1.2.3TRIZOL法提取样品的总RNA2 1.2.4反转录获取cDNA3 1.2.5验证其与蛋白库中结果一致3 2结果与分析4 2.1水杨酸途径基因荧光定量结果分析4 2.1.1OsPR1基因4 2.1.2OsPR2基因4 2.1.3OsPAL基因5 2.2茉莉酸途径基因荧光定量结果分析5 2.2.1OsPR3基因5 2.2.2OsPBZ1基因6 2.2.3OsLOX基因6 2.2.4OsAOS基因7 2.3乙烯信号途径基因荧光定量结果分析7 2.3.1OsGLIP1基因7 2.4相关抗病基因荧光定量结果分析8 2.4.1OsPOD基因8 2.4.2OsMDAR基因8 2.4.3OsMDH基因9 2.4.4OsBAP基因9 3讨论10 3.1水杨酸途径基因10 3.2茉莉酸途径基因10 3.3乙烯信号途径基因10 2.4结论11 致谢11 参考文献11 引言：水稻是世界上一种重要的粮食作物，我国自古以来就是农业大国，水稻更是我国的重要粮食作物。全国范围内种植水稻的农户占总农户数的一半。然而，水稻上病害严重危害着水稻的产量，水稻纹枯病作为水稻上的三大病害之一，每年对水稻产量都会造成极大的损失，因此研究水稻纹枯病的抗病性，挖掘水稻的抗病蛋白显得尤为重要。 水稻纹枯病(rice sheath blight)俗称 “烂脚瘟”、“花脚杆”、“烂脚杆”等，可危害水稻叶片、叶鞘、稻谷和茎杆等，其中以危害叶鞘为主，使水稻结实率降低，瘪谷率增加，粒重下降，严重影响水稻的产量和品质，一般可造成水稻产量损失 10%-30%，严重时损失可达到50%以上。田里存在较多的病原物、发病敏感期碰到过多的湿热气候、大面积种植感病品种、过度密植与过量施用化肥等措施都会加剧其病情。随着矮杆品种和与杂交稻的推广及施肥水平的提高，纹枯病的发生日趋严重，尤其是高产稻区受害最为严重。 水稻纹枯病致病菌是一种半腐生型的真菌，病原物有性态是瓜亡革菌(Thanatephorus cucumeris)，担子菌亚门亡革菌属的成员，无性态是立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)，半知菌亚门丝核菌属的成员。人工和自然条件下都很难发现它的有性态，侵染危害主要以无性态的菌丝为主。立枯丝核菌的寄主范围非常广，自然寄主大约有 15个科近50 个种的植物，人工接种时可侵染约 54 个科210 个种的植物，主要寄主的作物有水稻、高梁、玉米、粟、豆类和花生等。立枯丝核菌是一种通过土壤传播的死体营养型真菌[1,2]。它共有 13 个融合群（anastomosis group，AG）[2],其中水稻纹枯病菌主要为 AG-1[3]。在AG-1 的各菌株间，其致病能力也存在差异，可以按病菌的培养性状和致病能力划分为三个型，即A、B、C 型，其中A型的致病力最强，B型次之，C 型最弱[4] 。稻纹枯病菌主要为AG-1[3]。在 AG-1的各菌株间，其致病力也存在差异，可按病菌的培养性状和致病力划分为三个型，即 A、B、C 型，A型致病力最强，B型次之，C 型最弱 [4] 。 纹枯病危害水稻具有以下几个特点：1）可以危害水稻的各个部位，如叶鞘，叶片、谷壳和茎秆等，其中以危害叶鞘为主；2）可以侵染处于任何一个生育期的水稻，其中以水稻分蘖盛期至拔节初期和孕穗至抽穗后 15天为主要侵染期；3）侵染由下往上，先侵染下节位叶鞘，后接着侵染上一节叶鞘；4）纹枯病侵染水稻形成的病症为椭圆形或不规则卵形病斑。病斑面积由小变大；颜色由水渍状的绿色，变成中心灰白、周边棕色；5）纹枯病菌以菌核状态抵御不良环境。菌核分为下沉式和上浮式两种。刚形成的菌核为白色，成熟的菌核为咖啡色。下沉式菌核落入土壤中成为后续危害的主要菌源；漂浮于水面上的上浮式菌核，为当年扩大侵染的主要菌源。 (责任编辑：qin) |