亚锰对鲫鱼肝脏SOD、GSH-PX及CAT的影响(2)
时间:2019-08-28 20:07 来源:毕业论文 作者:毕业论文 点击:次
锰成为人类所必需的微量元素已有60多年，虽然在体内的含量微乎其微，却起着十分重要的作用。目前，已知锰参与多种酶的组成[2-5]，是机体酶及膜转运系统所需的重要物质，并常见于骨骼、肝脏、肾脏、胰脏中[6]。但如果体内锰含量过多就可能会引起中枢神经系统的损伤[7-8]，并损害肝脏、睾丸、胎盘和心血管等多个器官[9]。从以往的研究中我们可以知道，锰中毒会引起机体内脂质过氧化[10]，在此过程中产生的多种自由基产物能引起细胞功能障碍，损害有机体健康[9]。由于环境中锰的含量越来越多，锰对机体的影响也逐渐引起了人们的重视[11]。 肝脏是人体内主要的“排毒”器官，可以将来自体内和体外的一些非营养性物质，比如各类药物、毒物以及体内一些代谢产物通过新陈代谢将它们彻底分解或以原形排出体外，具有一定的生物转化作用，除外来化学物质代谢和生物转化作用之外肝脏还在身体里面起着去氧化，储存肝糖，分泌性蛋白质的合成等一系列的作用，吸收入体内的锰大部分存在于肝组织中。所以肝脏是最容易遭受重金属锰毒害的器官。 超氧化物歧化酶SOD是广泛存在于各类生物体中的最具神奇魔力的酶，被称为人体内的“清洁工”，能够清除超氧阴离子自由基（O2-)，保护细胞免受损伤，对机体的氧代谢平衡起着非常重要的作用，是生命健康之本[12-13]。谷胱甘肽过氧化物酶GSH-PX能够分解过氧化物，除此之外还可以特异的催化还原型谷胱甘肽（GSH）对过氧化氢的还原反应，具有保护细胞膜结构和功能完整的作用 [14-15]。过氧化氢酶CAT是一种存在于细胞器过氧化物体内并且能够催化过氧化氢分解成氧和水的抗氧化酶，在所有已知动物的各个组织中，尤其是在肝脏中的存在浓度最高。为了避免代谢过程中产生的过氧化氢对机体造成的损害， CAT可以迅速地将其转化分解为另外的无害或毒性较小的物质，所以CAT是的主要作用是在细胞内催化过氧化氢的分解 [15-19]。 本实验研究金属锰对鲫鱼肝脏SOD、GSH-PX、CAT活性的影响，分别以0.1 mol/L、0.5 mol/L、1.0 mol/L Mn2+浓度的自来水饲养三组鲫鱼作为模型组，含0 mol/LMn2+的为对照组，建立亚锰对鲫鱼肝SOD、GSH-PX、CAT的影响模型，分析不同浓度的Mn2+对鲫鱼肝脏SOD、GSH-PX、CAT活性影响。SOD、GSH-PX和CAT活力变化分别反映了Mn2+对鲫鱼肝脏细胞超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶和过氧化氢酶活力的影响机制以及Mn2+对鲫鱼的毒理性作用，对防治环境污染与保证鱼类的健康养殖具有非常重要的意义。 1 材料与方法 1.1 供试材料 1.1.1实验动物 野生鲫鱼，购买于徐州文沃市场，选择健康活泼，体表较为完好的鲫鱼24条，随机分为4组，放养于实验室内水箱中，每箱60 L水，以充分曝气3天的自来水作为静水水源，24 h持续供氧，将鲫鱼预饲养3天。 1.1.2实验试剂 超氧化物歧化酶（SOD）测定试剂盒、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）测定试剂盒、过氧化氢酶（CAT）测定试剂盒、生理盐水（0.9 %）。 表1 超氧化物歧化酶（SOD）测试盒的组成与配制 Table 1 The Composition and Preparation of Superoxide Dismutase (SOD) Test Kit 表2 谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）测定试剂盒的组成与配制 Table 2 The Composition and Preparation of Glutathione Peroxidase (GSH-PX) Test Kit 表3 过氧化氢酶（CAT）测定试剂盒的组成与配制 Table 3 The Composition and Preparation of Catalase (CAT) Test Kit 1.1.3实验设备 赛多利斯电子天平（200 g、500 g量程）、DK-SI4电热恒温水浴锅（2台）、7504型分光光度计（1 cm和0.5 cm光径比色皿一套）、TGL-16B高速台式离心机、1.5 ml EP管96个、手动组织匀浆器（4个）、1000 ul、100 ul、10 ul量程的Eppendorf移液枪各一支（并配备对应3种型号的枪头）。 (责任编辑：qin) |