宋河大曲放线菌的分离鉴定及其混菌作用(2)
时间:2019-08-30 12:51 来源:毕业论文 作者:毕业论文 点击:次
大曲作为中国浓香型白酒的主要糖化发酵剂，富含微生物和酶类，主要的微生物包括酵母菌、细菌、霉菌和放线菌，放线菌作为白酒酿造微生物中的一类，在培曲和糟醅发酵过程中，表现出一定的功能和特性，如某些放线菌可产生纤文素酶，破坏谷物细胞壁，利于淀粉释放，提高淀粉的利用率[3]；还有研究报道部分放线菌可有效解除窖泥的臭，从而提高白酒的品质；然而大多放线菌又可产生大量的次级代谢产物，尤其是抗生素，对多种菌种均有抑制作用，因此大曲中放线菌的种群结构和功能特性影响大曲的质量，进而影响浓香型白酒的产量和品质[4]。近年来，对白酒酿造过程中放线菌的研究主要集中在其对白酒风的影响以及发酵过程中对其它菌群的抑制作用[5,6]。 宋河白酒作为豫东地区的典型代表，对其酿酒微生物的研究也有不少报道，但是对白酒中放线菌的研究还从未有过。本研究以宋河大曲为原料，对放线菌进行分离鉴定，并对其中典型的放线菌与宋河大曲其他主要菌株的相互作用进行初步探索，以期对改善白酒风、放线菌的资源的利用与开发提供方法和理论参考。 1 材料与方法 1.1 实验所用材料仪器及试剂 1.1.1 实验试材及指示菌株 放线菌：生命科学与农学学院发酵工程实验室保藏的从宋河大曲中分离的放线菌，编号分别为F1、F2、F3、Fh、FM。 指示霉菌：生命科学与农学学院发酵工程实验室保藏的从宋河大曲中分离的红曲霉菌。 指示芽孢菌：生命科学与农学学院发酵工程实验室保藏的从宋河大曲中分离数量优势芽孢菌，编号分别为Sp1、Spm1、Spm2。 指示酵母菌：生命科学系发酵工程实验室保藏的从宋河大曲中分离的耐高温产酒酵母菌，编号分别为Y1、Y2。 1.1.2 主要培养基 高氏一号培养基[7]：可溶性淀粉2.0 g、硝酸钾0.1 g、磷酸氢二钾0.1 g、硫酸镁0.05 g、氯化钠0.05 g、硫酸亚铁0.001 g、琼脂2.0 g、水100 mL，pH值7.2-7.4。 糖发酵基础培养基[8]：蛋白胨10 g，氯化钠5 g，蒸馏1000 mL，调pH7.4 后，每100 mL培养基中加入0.2%酚红1 mL，混匀，使培养基呈紫红色，糖类（葡萄糖、麦芽糖、果胶、分别配成10%的浓度），0.1 MPa灭20 min。使用前将各种糖以无菌操作法按体积分数1%加入培养基中。 淀粉培养基[9]：牛肉膏0.5 g、蛋白胨1 g、氯化钠0.5 g、可溶性淀粉0.2 g、琼脂2 g、水100 mL，pH值 7.0-7.2。 明胶培养基[10]：蛋白胨1.0 g、牛肉膏0.3 g、NaCl 0.5 g、明胶12.0 g、蒸馏水100 mL，pH 值7.2-7.4。 硝酸盐培养基[11]：硝酸钾0.2 g、蛋白5.0 g、蒸馏100 mL，pH值7.4。 指示红曲霉菌培养基[12]：豆芽100 g，蒸馏水1000 mL，蔗糖50 g，自然pH。 指示酵母菌培养基[13]：豆芽100 g，蒸馏水1000 mL，蔗糖50 g，自然pH。 指示芽孢菌培养基[14]：牛肉膏0.3 g、蛋白胨1.0 g 、Nacl 0.5 g、琼脂2.0 g，pH (责任编辑：qin) |