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1.材料与方法

1.1 实验材料

    颗粒饱满的蚕豆种子。

1.2 仪器

    紫外灯、离心机、电子天平等。

1.3 实验方法

1.3.1 氯化钙溶液配制

    用电子天平称取一定量的氯化钙，配制出2mmol/L和6mmol/L的氯化钙溶液。

1.3.2蚕豆种子消毒、萌发及嫩苗的培养

    用5%的次氯酸钠将蚕豆种子浸泡30min，清洗干净，浸泡24小时，将其分别移至铺有滤纸的托盘中，上面覆盖一层滤纸，在室温下培养，并喷洒蒸馏水催芽，培养4 d后，将蒸馏水改为培养液进行培养，直到长出4-6片叶子。

1.3.3实验处理设置

    将长出4-6片真叶的蚕豆嫩叶分为1个对照组和6个处理组。对照组置于正常条件下培养；处理组1为蚕豆嫩苗每天紫外照射4 h，处理1 d；处理组2为蚕豆嫩苗紫外照射4 h，持续处理3 d；处理组3为蚕豆嫩苗每天紫外照射4 h，处理1 d，辐射结束后叶面喷洒浓度为2mmol/L的氯化对照组置于正常条件下培养；处理组4为蚕豆嫩苗每天紫外辐射4 h，处理1 d，辐射结束后叶面喷洒6 mmol/L CaCl2溶液；处理组5为蚕豆嫩苗每天紫外辐射4 h，连续处理3 d，辐射结束后叶面喷洒2 mmol/L CaCl2溶液；处理组6为蚕豆嫩苗每天紫外辐射4 h，连续处理3 d，辐射结束后叶面喷洒6 mmol/L CaCl2溶液。紫外辐射上午8:00开始，12:00结束，叶面喷洒CaCl2溶液中午12:00进行，喷洒时以叶面无液滴滴落为宜，注意每盘每次喷洒量保持一致。各处理组培养结束后将嫩苗恢复培养1 d，而后取叶片测定蚕豆嫩苗中游离脯氨酸含量、丙二醛(MDA)的生成量、可溶性蛋白合成量以及过氧化物酶(POD)活性等各项生理指标。

1.3.4生理指标测定方法

(1)叶绿素含量的测定

利用分光光度法[5]测定叶绿素合成量，用95%乙醇提取蚕豆嫩叶中的叶绿素，每个处理均设置重复（3个），叶绿素含量用平均值表示，下列所测指标表示方法相同。

(2)游离脯氨酸含量的测定

利用酸性茚三酮法[6]。

(3)丙二醛含量的测定

利用硫代巴比妥酸法[7]。

(4)可溶性蛋白含量的测定

利用考马斯亮蓝法[8]。

(6)过氧化物酶(POD)活性的测定

利用愈创木酚比色法[8]。

（7）可溶性糖含量的测定

利用蒽酮法[9-10]。