复合菌剂对有机磷农药毒害小麦的缓解作用(3)
时间:2017-03-27 21:23 来源:毕业论文 作者:毕业论文 点击:次
1.4 小麦生长指标的测定 小麦所测的生长指标包括根长、株高、茎粗、干重和湿重。根长、株高与茎粗采用细线与直尺相配合的方法进行测量。利用水遇热为水蒸气的原理，可用加热烘干法来测定植物组织的干重与湿重[8]。 1.4.1 小麦根长、株高、茎粗的测量 1.4.1.1 操作步骤 每盘轻拔出若干小麦，分别用细线量出小麦根长、株高的长度，并在细线上做好标记，然后用直尺测出所做标记的细线长度，并得出每盘小麦的平均根长、株高。把每盘所取的若干小麦横切，排成一排，测其直径总和，再计算出每株小麦的茎粗。 1.4.2 小麦干重、湿重的测定 1.4.2.1 操作步骤 （1）称量瓶的恒重：将洗净的8个称量瓶编号，放在105℃恒温烘箱中，烘两个小时左右，用坩埚钳取出放入干燥箱中冷却至室温后，在天平上称重。再于烘箱中烘两个小时，同样于干燥箱中冷却称重，如此重复两次（两次称重的误差不得超过0.002g），求得平均值为W1。 （2）将待测小麦叶片从植株上取下后迅速剪成小块，装入已知重量的称量瓶中盖好。在分析天平上准确称取重量，得瓶与鲜样品总量为W2，然后于105℃烘箱中干燥4～6小时（注意要打开称量瓶盖子）。取出称量瓶，待其温度降至60～70℃后，用坩埚钳将称量瓶盖上，放在干燥器中冷却至室温，再用分析天平称重，这样重复几次，直至恒重为止。称得重量是瓶与干样品总重量为W3。 1.4.2.2 结果计算 样品湿重（鲜重）：Wf =W2－W1 样品干重：Wd=W3－W1 1.5 小麦生理指标的测定 所测小麦的生理指标有叶绿素含量、POD、SOD、CAT活性以及MDA含量。叶绿素含量测定采用分光光度法[9]，POD活性测定采用愈创木酚法[9]，SOD活性测定采用氮蓝四唑（NBT）光化还原法[10]，CAT活性测定采用分光光度法[10]，MDA活性测定采用分光光度法[10] 。 1.5.1 叶绿素含量的测定 1.5.1.1 实验试剂 纯丙酮，80%丙酮，碳酸钙，石英砂 1.5.1.2 操作步骤 （1）取样：取新鲜叶片，剪碎，称取0.25g左右，放入研钵中，加入纯丙酮5mL，少许碳酸钙和石英砂，研磨成匀浆，再加入80%丙酮5mL，继续研磨至组织变白，在暗处静止3～5min后，用一层干滤纸过滤到25mL容量瓶中，用滴管吸取80%丙酮，将洗净研钵和周围色素过滤到容量瓶中，待滤纸和残渣全部变白后，用80%丙酮定容至刻度。 （2）吸光度测定：取上述色素提取液1mL，加80%丙酮4mL稀释后转入比色杯中，以80%丙酮为空白，分别测定OD663、OD645和OD652值。 1.5.1.3 结果计算 叶绿素a、b含量用以下公式: Ca=12.7×OD663－2.69×OD645 Cb=22.9×OD645－4.68×OD663 已知，叶绿素a和b的80%丙酮提取液在652nm处有相同的比吸收系数。因此，叶绿素的总量（CT）计算有两种方法，即： (责任编辑：qin) |