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(3) 吸取上清液至1.5ml的新离心管，加入200μl的氯仿，上下剧烈振摇3min，室温放置至分层，再以4℃，12000rpm的设置离心10min。重复（3）操作一次。

(4) 吸取上清液，加入500μl预冷的异丙醇，混合均匀，室温下静置5-10min，以4℃，12000rpm的设置离心10min，弃上清。

(5) 加入1ml浓度为75％的乙醇溶液，轻柔振荡离心管，悬浮沉淀，再以4℃，12000rpm离心5min，室温下晾干至半透明状。

(6) 加入20-50μl的DEPC-H2O溶解沉淀，60℃恒温水浴10min，取1μl样液检测RNA样品浓度和纯度，另取3μl样液电泳，检测RNA样品的完整性。