水稻不育突变体f287的图位克隆及功能预测(3)
时间:2020-05-05 14:54 来源:毕业论文 作者:毕业论文 点击:次
1．1．1 实验材料 本研究以从宁粳4号的EMS诱变群体中筛选得到不育突变体f287为研究材料。f287/宁粳4号的杂交后代用作突变基因的遗传分析。构建定位群体时，以突变体f287为母本，籼稻品种dular为父本配组，选取F2群体中的169个隐性极端单株进行研究。所有材料均种植于江苏省农科院。 1．1．2 主要实验试剂及其配置 凝胶电泳工作液配方： (1) 0.5 M EDTA (pH 8.0 )配方： Na2EDTA•2H2O 186.1 g 10 mol/L NaOH 调至pH 8.0 (约50 mL)， 总体积 1 L (2) 10×TBE配方: Tris 108 g 硼酸 55 g 0.5 M EDTA (pH8.0) 40 mL 总体积 1 L 电泳缓冲液为0.5×TBE，需要进行1:19稀释后方可使用 (3) 40% PAGE配方: 丙烯酰胺 380 g Bis-丙烯酰胺 20 g 总体积 1 L 4℃保存 (4) 10% APs配方: 过硫酸铵溶 30 g 总体积 300 mL APs现用现配 (5) 指示剂配方: 溴酚蓝 0.25 g 二甲苯氰 0.25 g 蔗糖 40 g 总体积 100 mL 8%的非变性聚丙烯酰胺凝胶的配方如下 (责任编辑：qin) |