N-糖基化位点对毕赤酵母表达的重组弹性蛋白酶活性的影响(3)
时间:2020-07-31 20:39 来源:毕业论文 作者:毕业论文 点击:次
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2、YPD培养基（1L）：10g酵母膏，20g蛋白胨，20g葡萄糖，若制固体培养基，加入20g琼脂粉，自然pH。 3、BMGY培养基（1L）：15g酵母膏，20g蛋白胨，10g甘油和100mmol/L的pH6.0磷酸钾缓冲液，4×10-4g生物素。（4×10-4g生物素：每100mL培养基添加0.2mL 0.02％的生物素，生物素是预先过滤除菌的。） 4、MD培养基（1L）：13.4g酵母基本氮源（YNB），4×10-4g生物素和20g葡萄糖，自然pH，若制固体培养基，加入20g琼脂粉。（YNB：每100mL添加13.4％的YNB，YNB是预先过滤除菌的） 2.1.3 酶和试剂 限制性内切酶EcoRI、AvrII和T4 DNA连接酶购自Fermentas公司，Pfu DNA高保真聚合酶购自生工生物工程（上海）有限公司，SacI酶购自Thermo公司，DNA Marker DL10001、DNA Marker DL2501和DNA提取试剂盒购自上海捷瑞生物工程有限公司，其他化学试剂均为国产分析纯。 (责任编辑：qin) |